MicroRNA-146a介导IL-6/STAT3信号通路在腰椎间盘退行性变中的机制研究

发布时间：2024-02-24 10:26

　　目的研究MicroRNA-146a介导IL-6/STAT3信号通路在腰椎间盘退行性变中的机制。方法选择10例腰椎间盘突出症患者(观察组)和10例腰椎爆裂性骨折或骨折脱位需要减压融合内固定手术的患者(对照组),手术取得病灶髓核组织,qPCR法检测MicroRNA-146a表达,进行细胞培养和髓核细胞慢病毒转染预实验;分别采用MicroRNA-146a 空载体、MicroRNA-146a mimic 和 MicroRNA-146a inhibitor 与两组细胞共培养24h,检测转染效率;采用ELISA法检测细胞IL-6、Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)水平,Western blot法检测STAT3、基质金属蛋白酶(MMP)-3和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)表达水平。结果观察组细胞MicroRNA-146a水平明显高于对照组,对照组处理前后IL-6、ColⅡ、aggrecan、STAT3、MMP-3和ADAMTS水平比较均无差异(P>0.05)。处理前观察组细胞 MicroRNA-146a、IL-6、STAT3、MMP-3 和...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

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??图１实时定量ＰＣ艮法检测ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ水平（观察组ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ水平??明盈高于对照组）??Ｆｉｇｕｒｅ?１；?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ?ｌｅｖｅｌｓ?ｖｉａ?ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ＰＣ民（ｌｅｖｅｌ....

图２倒置相差愚微镜下观察第２代细胞（２００ｘ，短梭形为主，折光性好，可见??短而粗的突起，向四周呈树枝状发出，有次级突

为了观察ｍｉＲ－１４６ａ对髓核细胞的调控作用，本实验，利用酶消化法获得原??代髓核细胞。倒置相差显微镜下观察第２代细胞，Ｗ短梭形为主，折光性好，??可见短而粗的突起，向四周呈树枝状发出，有次级突。（见图２）。??图２倒置相差愚微镜下观察第２代细胞（２００ｘ，短梭形为主，折光性好，....

图４；四组培养条件下的慢病毒感染效果??Ｆｉｇｕｒｅ?４；?Ｔｈｅ?ｅｆＦｉｅｎｃｙ?ｏｆ?ｌｅｎｔｉｖｉｎｉｓ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｉｎ?ｆｏｕｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ??

南京医科大学博±学位论文??ｍｉｍｉｃ、ｍｉＲ－１４６ａ?ｍｉｍｉｃ?ｃｏｎｔｒｏｌ、ｍｉＲ－１４６泣?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?及?ｍｉＲ－１４６ａ?ｉｎｈ化ｉｔｏｒ?ｃｏｎｔｒｏｌ??转染入髓核细胞中。而在进行慢病毒转染之前，需做预实验。如图４所示最佳??感染条件为ＭＯＩ＝１０添加....

图５；细胞转染鉴定细胞ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａｍＲＮＡ水平（Ａ为转染前，观察组明??

ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ?ｍＲＮＡ?水平提高?１５?倍，而?ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａ?ｉ血ｂｉｔｏｒ?处理后??ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａｍＲＮＡ水平降低至原来１／３，证实转染效果较好。转染前观察组??细胞ＭｉｃｒｏＲＮＡ－１４６ａｍＲＮＡ水平明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。....

本文编号：3908855