hucMSCs-exo通过JNK信号通路减轻大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧损伤水肿

发布时间：2023-10-29 19:12

　　目的:研究人脐带间充质干细胞来源外泌体(hucMSCs-exo)对减轻大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧损伤水肿的作用及机制。方法:超高速离心法分离提取hucMSCs-exo,western blot方法检测细胞内AQP4蛋白的表达量,活细胞工作站检测细胞体积,电镜观察细胞水肿超微结构的变化。通过应用JNK抑制剂sp600125抑制JNK蛋白的表达,检测细胞体积、AQP4表达及p-JNK蛋白表达水平。结果:hucMSCs-exo干预OGD6h/R24h后的脊髓星形胶质细胞,电镜可见细胞中线粒体、内质网的水肿减轻,溶酶体数量减少;活细胞工作站测量细胞水肿的体积显著降低(3683.78±954.17);western blot检测细胞AQP4的表达量较对照组明显减少(P<0.05)。应用hucMSCs-exo与SP600125抑制JNK后细胞中p-JNK表达明显降低(P<0.05),同时细胞中AQP4表达也随之减少(P<0.05),细胞水肿的体积变小(3751.37±736.42)。结论:1.高浓度的hucMSCs-exo能明显降低OGD6h/R24h后脊髓星形胶质细胞中...

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
前言
第一部分 hucMSCs及hucMSCs-exo的分离提取及鉴定
    1 材料与方法
        1.1 主要材料
        1.2 主要仪器
        1.3 主要试剂配制
        1.4 细胞培养
        1.5 hucMSCs-exo的提取及初步鉴定
        1.6 统计分析
    2 结果
        2.1 光镜下观察原代人脐带间充质干细胞
        2.2 人脐带间充质干细胞的纯度鉴定
        2.3 hucMSCs-exo鉴定
    3 讨论
    4 结论
第二部分 hucMSCs-exo对OGD6h/R24h后大鼠脊髓星形胶质细胞水肿的影响
    1 材料与方法
        1.1 主要抗体、试剂及耗材
        1.2 主要仪器
        1.3 主要试剂配制
        1.4 细胞培养
        1.5 氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型的建立
        1.6 利用活细胞工作站检测细胞体积
        1.7 Western blot检测星形胶质细胞蛋白的表达
        1.8 统计分析
    2 结果
        2.1 hucMSCs-exo对OGD/R后脊髓星形胶质细胞水肿体积的影响
        2.2 透射电镜观察OGD/R后星形胶质细胞水肿超微结构的变化
        2.3 hucMSCs-exo对OGD/R后脊髓星形胶质细胞AQP4蛋白表达的影响
    3 讨论
    4 结论
第三部分 研究hucMSCs-exo对OGD/R后大鼠脊髓星形胶质细胞水肿的机制
    1 材料与方法
        1.1 主要试剂、抗体及材料
        1.2 主要仪器
        1.3 主要试剂配制
        1.4 细胞培养
        1.5 氧糖剥夺/复氧模型建立
        1.6 利用活细胞工作站检测细胞的体积
        1.7 Westernblot检测星形胶质细胞蛋白的表达
        1.8 统计分析
    2 结果
        2.1 SP600125对OGD/R后大鼠脊髓星形胶质细胞体积的影响
        2.2 hucMSCs-exo、SP600125对OGD/R后大鼠脊髓星形胶质细胞AQP4蛋白的表达及核中JNK活化的影响
    3 讨论
    4 结论
参考文献
综述 间充质干细胞来源外泌体在脊髓损伤中的作用研究进展
    参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3858696