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微渠多孔羟基磷灰石支架诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的miRNA表达谱分析

发布时间:2024-04-08 21:23
  背景:多孔羟基磷灰石支架具有良好的体内外成骨效能,但其所涉及的mi RNAs复杂调控机制相关研究较少。目的:探讨多孔羟基磷灰石支架材料介导大鼠骨髓间充质干细胞成骨矿化过程中相关miRNA表达谱的变化。方法:体外分离、培养和鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞与多孔羟基磷灰石支架共培养为实验组,骨髓间充质干细胞单独培养为空白对照组,分别进行成骨诱导7 d,运用miRNA高通量测序技术分析两组骨髓间充质干细胞成骨矿化过程中相关miRNA表达谱的变化并进行GO分析,筛选出两组中表达差异明显的mi RNA分子并进行q RT-PCR验证。结果与结论:①与空白对照组比较,成骨诱导7 d时实验组BMP2、ALP、Runx2 mRNA表达上调,其中BMP2上调明显(P <0.05);②micro RNA高通量测序结果显示mi R-210-3p、mi R-146a-5p等13个mi RNAs明显上调;let-7c-3p、let-3615等17个mi RNAs明显下调;③GO分析上调的mi RNA靶基因主要参与生物学调节、细胞基因表达、基因表达调节等,包括NF-κB、Toll样受体9、细胞间...

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图1光镜下骨髓间充质干细胞的形态(×40)

图1光镜下骨髓间充质干细胞的形态(×40)

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图2流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志物

图2流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志物

图1光镜下骨髓间充质干细胞的形态(×40)图4RNA凝胶电泳图像


图4RNA凝胶电泳图像

图4RNA凝胶电泳图像

图2流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志物图6miRNA表达谱的聚类分析及热图绘制


图6miRNA表达谱的聚类分析及热图绘制

图6miRNA表达谱的聚类分析及热图绘制

图4RNA凝胶电泳图像图7差异miRNA靶基因参与的生物学过程



本文编号:3948834

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