打孔基质支架和BMSCs组织工程半月板的构建及其移植效果研究
发布时间：2024-01-04 19:44
半月板撕裂是一种最常见的膝关节损伤。虽然外科手术方法可以缝合修复撕裂的半月板,但其仅在外周的血管区域有效并且通常有30%几率发生再撕裂。部分或全部半月板切除术短时间内能减缓关节疼痛和改善功能,但会增加关节软骨的压力,导致软骨退变、骨关节炎和膝关节不稳定。半月板组织工程旨在再生受损组织,为修复半月板损伤提供了可行的解决方案。其中,支架是组织工程的一大要素。半月板脱细胞基质保留了生物化学组成、生物活性和三维结构,具有与天然半月板相当的生物力学性质,且免疫原性低、有再生潜力,是构建组织工程半月板的一种理想支架。可是半月板内紧密排列的胶原纤维网络结构使其基质密度过高,显示出较低的孔隙率,限制了损伤处细胞的增殖、迁移和基质重塑。无论是外源接种的种子细胞还是关节腔内邻近的滑膜细胞都无法渗入支架内部,进而再分布合成必要的细胞外基质,长期来看不具有重塑和维持组织稳态的能力。因此,本试验首先对天然半月板以垂直于下表面方向穿透全层进行均匀打孔,然后通过反复冻融、SDS洗涤和超声波清洗等步骤进行脱细胞处理以制备基质支架,通过DNA定量试验和组织学染色确认脱细胞效果,并检测打孔对脱细胞处理时间的影响以及打孔后...
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 半月板概述
1.1.1 半月板的解剖结构
1.1.2 半月板的生物化学
1.1.3 半月板的血液供给
1.1.4 半月板的生物力学功能
1.2 半月板的损伤与修复
1.2.1 损伤原因与分类
1.2.2 半月板切除术
1.2.3 半月板同种异体移植
1.3 脱细胞基质支架在半月板组织工程中的应用
1.3.1 半月板脱细胞基质支架的制备
1.3.2 脱细胞基质支架的生物力学性能
1.3.3 脱细胞基质支架的细胞浸润
1.4 BMSCs在半月板组织工程中的应用
第二章 打孔增加半月板基质支架孔隙率的可行性研究
2.1 试验材料
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要仪器
2.2 试验方法
2.2.1 半月板的采集与打孔处理
2.2.2 半月板脱细胞处理及支架DNA含量检测
2.2.3 打孔支架的组织学观察
2.2.4 打孔支架的孔隙率与力学性能测定
2.2.5 打孔支架微观结构及BMSCs附着的扫描电镜观察
2.2.6 打孔支架上BMSCs的增殖检测
2.2.7 打孔支架上BMSCs的软骨向分化检测
2.2.8 统计方法
2.3 试验结果
2.3.1 支架的DNA定量检测结果
2.3.2 支架的组织学观察结果
2.3.3 支架的孔隙率与力学性能检测结果
2.3.4 支架微观结构与BMSCs附着扫描电镜观察结果
2.3.5 支架上BMSCs的增殖结果
2.3.6 支架上BMSCs的软骨分化检测结果
2.4 讨论
2.4.1 半月板基质支架的孔隙率
2.4.2 半月板基质支架的力学性能
第三章 打孔支架复合BMSCs构建组织工程半月板的体内移植效果研究
3.1 试验材料
3.1.1 试验动物
3.1.2 主要试剂与仪器
3.2 试验方法
3.2.1 体外构建组织工程化半月板
3.2.2 试验动物分组
3.2.3 建立半月板缺损模型进行组织工程化半月板移植
3.2.4 试验犬术后临床观察
3.2.5 试验犬膝关节解剖观察
3.2.6 半月板移植物的组织学与免疫组织化学观察
3.2.7 股骨髁和胫骨平台的组织学观察
3.2.8 数据统计
3.3 试验结果
3.3.1 临床观察和Lysholm评分结果
3.3.2 解剖观察结果
3.3.3 半月板移植物的组织学染色结果
3.3.4 半月板移植物的免疫组织化学染色结果
3.3.5 股骨髁与胫骨平台的组织学染色结果
3.4 讨论
3.4.1 半月板移植手术
3.4.2 打孔半月板移植物在体内的修复
3.4.3 半月板移植物对软骨的保护
第四章 结论
参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3876955
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 半月板概述
1.1.1 半月板的解剖结构
1.1.2 半月板的生物化学
1.1.3 半月板的血液供给
1.1.4 半月板的生物力学功能
1.2 半月板的损伤与修复
1.2.1 损伤原因与分类
1.2.2 半月板切除术
1.2.3 半月板同种异体移植
1.3 脱细胞基质支架在半月板组织工程中的应用
1.3.1 半月板脱细胞基质支架的制备
1.3.2 脱细胞基质支架的生物力学性能
1.3.3 脱细胞基质支架的细胞浸润
1.4 BMSCs在半月板组织工程中的应用
第二章 打孔增加半月板基质支架孔隙率的可行性研究
2.1 试验材料
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要仪器
2.2 试验方法
2.2.1 半月板的采集与打孔处理
2.2.2 半月板脱细胞处理及支架DNA含量检测
2.2.3 打孔支架的组织学观察
2.2.4 打孔支架的孔隙率与力学性能测定
2.2.5 打孔支架微观结构及BMSCs附着的扫描电镜观察
2.2.6 打孔支架上BMSCs的增殖检测
2.2.7 打孔支架上BMSCs的软骨向分化检测
2.2.8 统计方法
2.3 试验结果
2.3.1 支架的DNA定量检测结果
2.3.2 支架的组织学观察结果
2.3.3 支架的孔隙率与力学性能检测结果
2.3.4 支架微观结构与BMSCs附着扫描电镜观察结果
2.3.5 支架上BMSCs的增殖结果
2.3.6 支架上BMSCs的软骨分化检测结果
2.4 讨论
2.4.1 半月板基质支架的孔隙率
2.4.2 半月板基质支架的力学性能
第三章 打孔支架复合BMSCs构建组织工程半月板的体内移植效果研究
3.1 试验材料
3.1.1 试验动物
3.1.2 主要试剂与仪器
3.2 试验方法
3.2.1 体外构建组织工程化半月板
3.2.2 试验动物分组
3.2.3 建立半月板缺损模型进行组织工程化半月板移植
3.2.4 试验犬术后临床观察
3.2.5 试验犬膝关节解剖观察
3.2.6 半月板移植物的组织学与免疫组织化学观察
3.2.7 股骨髁和胫骨平台的组织学观察
3.2.8 数据统计
3.3 试验结果
3.3.1 临床观察和Lysholm评分结果
3.3.2 解剖观察结果
3.3.3 半月板移植物的组织学染色结果
3.3.4 半月板移植物的免疫组织化学染色结果
3.3.5 股骨髁与胫骨平台的组织学染色结果
3.4 讨论
3.4.1 半月板移植手术
3.4.2 打孔半月板移植物在体内的修复
3.4.3 半月板移植物对软骨的保护
第四章 结论
参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3876955
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/swyx/3876955.html