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软骨细胞外基质/丝素仿生支架的研究

发布时间:2023-07-31 20:06
  目的探讨应用软骨细胞外基质/丝素仿生支架构建组织工程软骨的可行性。方法1.软骨细胞外基质(ECM)的制备:取山羊新鲜的透明软骨,应用匀浆-脱细胞-冷冻研磨-筛选方法制作软骨细胞外基质粉末。2.软骨细胞外基质/丝素(ECM/SF)的制作:使用冷冻干燥法制作四组支架,并采用京尼平乙醇溶液进行化学交联处理。(1)1:1 ECM/SF支架:由细胞外基质悬液和丝素溶液1:1混合制作而成。(2)2:1 ECM/SF支架:由细胞外基质悬液和丝素溶液2:1混合制作而成。(3)4:1 ECM/SF支架:由细胞外基质悬液和丝素溶液4:1混合制作而成。(4)ECM支架:单纯由细胞外基质悬液制作而成。3.对该支架行压缩模量测定,傅立叶红外变换光谱分析其蛋白质二级结构,扫描电镜(SEM)检测其微观结构,初步计算其孔径和孔隙率。对该支架进行CCK-8细胞毒性实验,活细胞死细胞染色并用荧光显微镜观察判定支架的细胞毒性。4.骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离与培养:BMSCs传代至2-3代备用。5.生化含量测定等实验评估骨髓间充质干细胞成软骨分化以及基质分泌的能力。6.实时荧光定量PCR测定评估骨髓间充质干细胞成软...

【文章页数】:72 页

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本文编号:3838015

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