Triad1通过p53通路促进类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的凋亡

发布时间：2023-05-28 11:56

　　目的检测Triad1(two RING fingers and DRIL[double RING finger linked]1)在人类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)膝关节滑膜中的表达,分析其与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(Rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA FLS)凋亡的关系,并探索其参与RA FLS凋亡的可能信号通路。方法1.选取15例RA病人作为实验组,6例胫骨平台骨折病人作为对照组(胫骨平台骨折病人无RA病史,无半月板和交叉韧带损伤史)。2.使用免疫组化、免疫荧光和Western blot方法检测类风湿关节炎病人和胫骨平台骨折病人膝关节滑膜中Triad1的表达情况。3.从接受膝关节置换的RA病人滑膜中分离培养RA FLS,并用阿霉素(Adriamycin,ADR)诱导其凋亡。4.用Western blot方法检测阿霉素刺激RA FLS后,在不同时间点(0h,6h,12h,24h,36h)Triad1、p53以及Cleaved caspase3(C-caspase3)的表达情况。5...

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 课题来源、研究的目的和意义
    1.2 国内外研究概况
    1.3 论文的主要研究内容
第二章 材料与方法
    2.1 研究资料及仪器设备
        2.1.1 滑膜来源
        2.1.2 主要仪器、试剂与耗材
    2.2 实验流程与方法
        2.2.1 RA及对照组滑膜组织的免疫组织化学染色
        2.2.2 RA及对照组滑膜组织的免疫荧光检测
        2.2.3 RA FLS的分离培养
        2.2.4 阿霉素诱导RA FLS凋亡
        2.2.5 滑膜组织蛋白的制备
        2.2.6 Western印迹法检测蛋白的表达
        2.2.7 细胞免疫荧光
        2.2.8 RA FLS转染
        2.2.9 EDU（5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷，5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）染色检测下调RA FLS中Triad1的表达后对其增殖的影响
        2.2.10 TUNEL（末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法，Terminal dexynucleotidyl transferase（Td T）-mediated d UTP nick endlabeling）检测上调RA FLS中Triad1的表达对其凋亡的影响
        2.2.11 流式凋亡分析
        2.2.12 溶液的配制
        2.2.13 统计学处理
第三章 结果
    3.1 验证Triad1在人类风湿关节炎滑膜组织中的表达
    3.2 Triad1与RA FLS凋亡的可能关系
    3.3 下调RA FLS中Triad1的表达影响其凋亡相关蛋白的水平
    3.4 下调RA FLS中Triad1的表达对其增殖的影响
    3.5 上调RA FLS中Triad1的表达对其凋亡的影响
    3.6 Triad1可能通过p53通路诱导RA FLS的凋亡
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
英文缩写词表
综述
    综述参考文献
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目
    A：在国内外刊物上发表的论文
    B：所参加的项目
    C：所获得的荣誉
致谢



本文编号：3824544