巴马小型猪高血糖家系的选育
发布时间：2022-08-13 17:25
随着社会的发展,人们还不能完全适应日趋丰富的饮食,糖尿病的发病率逐年上升,目前已成为继肿瘤、心血管疾病之后严重影响人类健康的疾病。小型猪的胰岛素肽链氨基酸组成和人类最为相近,自身的糖代谢、脂代谢的特点也与人类接近,小型猪是研究糖尿病及其并发症研究的理想模型动物。N-乙基-N-亚硝基脲（ENU）是一种较强的基因诱变剂,能在相对较短的时间内诱导产生大量随机突变表型,进一步通过表型筛选及遗传试验可能获得具有特殊表型的突变系动物,可用于建立人类遗传性疾病研究新模型。本研究采用巴马小型猪作为实验对象,通过ENU诱变剂筛选建立大型哺乳动物基因突变模型和人类疾病动物模型。在筛选过程中通过对猪只空腹血糖的定时监测,获得一头血糖偏高的种公猪。通过近亲繁殖的方式,经过数代净化,建立高血糖家系。本论文主要研究内容:（1）以85mg/lkg剂量直接在巴马猪公猪阴囊部位注射ENU诱变剂,获得可提供诱变精液的种公猪。目前已建立一个可遗传的血糖持续偏高家系2907家系,其G1代2907种公猪24个月空腹血糖持续6.3mmol/L水平以上。G3、G4代连续6个月的餐前血糖平均值分别为5.56 mmol/L和6.59 ...
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 综述
1.1 糖尿病和糖尿病动物模型的研究现状
1.1.1 糖尿病的简介
1.1.2 现有的糖尿病动物模型
1.2 小型猪糖尿病模型的研究状况
1.2.1 我国主要小型猪品种介绍
1.2.2 小型猪在糖尿病动物模型的应用优势
1.2.3 小型猪在糖尿病研究中应用
1.3 ENU诱变与育种
1.3.1 表型驱动法建模
1.3.2 ENU诱变法建模
1.4 本研究的技术路线、目的和意义
1.4.1 本研究的技术路线
1.4.2 本研究的目的
1.4.3 本研究的意义
第二章 巴马小型猪高血糖家系种公猪的选育与建系
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 实验动物
2.2.2 主要仪器
2.2.3 实验方法
2.3 数据统计分析
2.4 结果与分析
2.5 讨论
2.5.1 2907家系种公猪的维持问题
2.5.2 2907家系选育成功的可行性问题
2.5.3 血糖偏高家系进一步培育的策略
2.5.4 血糖偏高家系仔猪护理
2.6 结论
2.7 附图
第三章 巴马小型猪高血糖家系生理生化及血糖相关指标的测定
3.1 引言
3.2 材料与方法
3.2.1 实验动物与分组
3.2.2 主要试剂与仪器
3.2.3 实验方法
3.3 数据统计分析
3.4 结果与分析
3.5 讨论
3.6 结论
第四章 巴马小型猪高血糖家系组织病理学观察和转录组测序
4.1 引言
4.2 材料与方法
4.2.1 实验动物与分组
4.2.2 主要试剂与仪器
4.2.3 实验方法
4.3 数据统计分析
4.3.1 参考基因组比对分析
4.3.2 转录组装和新样本预测
4.3.3 差异表达基因GO功能分析
4.3.4 SNP和INDEL的注释
4.3.5 可变性剪切事件统计
4.4 结果与分析
4.4.1 一次性注射链脲佐菌素诱导巴马小型猪糖尿病模型
4.4.2 肝脏、胰脏和皮肤组织的提取
4.4.3 肝脏、胰腺和皮肤组织切片结果
4.4.4 RNA抽提和纯化
4.4.5 测序数据质量统计结果
4.4.6 正常对照组和血糖偏高猪的差异
4.4.7 肝脏差异基因相关通路分析
4.4.8 荧光定量PCR验证结果
4.5 讨论
4.5.1 小型猪糖尿病模型的建立问题
4.5.2 巴马小型猪活体取肝脏和胰脏组织
4.5.3 肝脏、胰脏和皮肤组织病理学观察
4.5.4 肝脏转录组高通量测序
4.6 结论
4.7 附表和图
第五章 总结
参考文献
英文缩写词表
论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]针刺对视网膜变性大鼠感光细胞形态学变化的影响[J]. 马瑞玲,吴根诚,张仁. 中国针灸. 2015(11)
[2]糖尿病动物模型研究进展及在中药研究中的应用[J]. 成龙,申竹芳,孙桂波,孙晓波. 药学学报. 2015(08)
[3]一次性静脉注射高剂量链脲佐菌素建立1型糖尿病小型猪模型[J]. 崔永春,李凯,张宏,刘晓鹏,袁卫民,李巨波,吴爱丽,唐跃. 中国实验动物学报. 2014(04)
[4]五指山小型猪诱导多能干细胞的前景分析[J]. 胡鹏飞,李向臣,关伟军,马月辉. 中国畜牧兽医. 2014(07)
[5]血管代谢物在糖尿病心血管并发症早期诊断中的应用[J]. 陈鲲,粟芃芃,邱楚英,王雪君,汤恺,秦嘉裕,王子纯,周伯春. 广州大学学报(自然科学版). 2014(02)
[6]巴马小型猪在医学研究中的应用进展[J]. 庞琳琳,张会永,杨关林. 中国实验动物学报. 2014(01)
[7]多次小剂量STZ诱导的成年鼠糖尿病指标的自发恢复[J]. 李如江,邱曙东,田宏,周生伟. 动物学研究. 2013(03)
[8]二甲双胍对STZ诱导小鼠AD样症状的保护作用的研究[J]. 宋金芝,熊慧,丁玲,郑晨,王景景,邓艳秋. 中国药理学通报. 2013(06)
[9]糖尿病患者血脂4项和凝血4项指标的变化及临床意义[J]. 徐立民. 中国伤残医学. 2013(01)
[10]老年糖尿病并发症的临床分析[J]. 何永静. 当代医学. 2012(31)
博士论文
[1]整合转录组及全基因组重测序方法鉴定影响猪脂肪沉积的关键基因及其变异[D]. 邢凯.中国农业大学 2015
[2]糖尿病早期诊断肽类生物标志物候选物的基础研究[D]. 苏锐.北京理工大学 2014
[3]新一代测序在中国青少年起病的成人型糖尿病致病基因检测中的应用[D]. 刘一静.北京协和医学院 2014
[4]中西医治疗2型糖尿病的知识图谱分析[D]. 王淑斌.北京中医药大学 2014
[5]高脂诱导的氧化应激对小鼠肠道菌群改变与炎症反应的影响[D]. 乔艺.江南大学 2014
[6]2型糖尿病相关的代谢组学和生物信息学研究[D]. 黄建华.中南大学 2014
[7]宏基因组数据分析中的统计方法研究[D]. 常秦.山东大学 2012
[8]RNA-seq数据的处理与应用[D]. 王立坤.吉林大学 2012
[9]高血糖动物模型的建立及其影响因素研究[D]. 王竹.中国疾病预防控制中心 2009
硕士论文
[1]2型糖尿病患者患病情况及慢性并发症的相关因素分析[D]. 王月娟.吉林大学 2015
[2]ENU诱变巨结肠小鼠模型的分子机制研究[D]. 糜婷.扬州大学 2014
[3]2型糖尿病与血脂及载脂蛋白水平关系的Meta分析[D]. 马文艳.山西医科大学 2014
[4]巴马香猪血液生理生化指标参考标准的建立及ENU诱变下血液指标异常个体的筛选[D]. 李亮.第三军医大学 2013
[5]高脂高糖诱导巴马小型猪2型糖尿病及肝脏转录组研究[D]. 夏吉瀚.中国农业科学院 2012
[6]版纳微型猪糖尿病模型建立及其PKB的表达研究[D]. 王月婷.南华大学 2012
[7]基于RNA-Seq技术的人转录组分析研究[D]. 陈超.中南大学 2011
[8]超敏C-反应蛋白与糖尿病血管病变及中医证型相关性研究[D]. 张常波.北京中医药大学 2008
本文编号：3677446
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 综述
1.1 糖尿病和糖尿病动物模型的研究现状
1.1.1 糖尿病的简介
1.1.2 现有的糖尿病动物模型
1.2 小型猪糖尿病模型的研究状况
1.2.1 我国主要小型猪品种介绍
1.2.2 小型猪在糖尿病动物模型的应用优势
1.2.3 小型猪在糖尿病研究中应用
1.3 ENU诱变与育种
1.3.1 表型驱动法建模
1.3.2 ENU诱变法建模
1.4 本研究的技术路线、目的和意义
1.4.1 本研究的技术路线
1.4.2 本研究的目的
1.4.3 本研究的意义
第二章 巴马小型猪高血糖家系种公猪的选育与建系
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 实验动物
2.2.2 主要仪器
2.2.3 实验方法
2.3 数据统计分析
2.4 结果与分析
2.5 讨论
2.5.1 2907家系种公猪的维持问题
2.5.2 2907家系选育成功的可行性问题
2.5.3 血糖偏高家系进一步培育的策略
2.5.4 血糖偏高家系仔猪护理
2.6 结论
2.7 附图
第三章 巴马小型猪高血糖家系生理生化及血糖相关指标的测定
3.1 引言
3.2 材料与方法
3.2.1 实验动物与分组
3.2.2 主要试剂与仪器
3.2.3 实验方法
3.3 数据统计分析
3.4 结果与分析
3.5 讨论
3.6 结论
第四章 巴马小型猪高血糖家系组织病理学观察和转录组测序
4.1 引言
4.2 材料与方法
4.2.1 实验动物与分组
4.2.2 主要试剂与仪器
4.2.3 实验方法
4.3 数据统计分析
4.3.1 参考基因组比对分析
4.3.2 转录组装和新样本预测
4.3.3 差异表达基因GO功能分析
4.3.4 SNP和INDEL的注释
4.3.5 可变性剪切事件统计
4.4 结果与分析
4.4.1 一次性注射链脲佐菌素诱导巴马小型猪糖尿病模型
4.4.2 肝脏、胰脏和皮肤组织的提取
4.4.3 肝脏、胰腺和皮肤组织切片结果
4.4.4 RNA抽提和纯化
4.4.5 测序数据质量统计结果
4.4.6 正常对照组和血糖偏高猪的差异
4.4.7 肝脏差异基因相关通路分析
4.4.8 荧光定量PCR验证结果
4.5 讨论
4.5.1 小型猪糖尿病模型的建立问题
4.5.2 巴马小型猪活体取肝脏和胰脏组织
4.5.3 肝脏、胰脏和皮肤组织病理学观察
4.5.4 肝脏转录组高通量测序
4.6 结论
4.7 附表和图
第五章 总结
参考文献
英文缩写词表
论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]针刺对视网膜变性大鼠感光细胞形态学变化的影响[J]. 马瑞玲,吴根诚,张仁. 中国针灸. 2015(11)
[2]糖尿病动物模型研究进展及在中药研究中的应用[J]. 成龙,申竹芳,孙桂波,孙晓波. 药学学报. 2015(08)
[3]一次性静脉注射高剂量链脲佐菌素建立1型糖尿病小型猪模型[J]. 崔永春,李凯,张宏,刘晓鹏,袁卫民,李巨波,吴爱丽,唐跃. 中国实验动物学报. 2014(04)
[4]五指山小型猪诱导多能干细胞的前景分析[J]. 胡鹏飞,李向臣,关伟军,马月辉. 中国畜牧兽医. 2014(07)
[5]血管代谢物在糖尿病心血管并发症早期诊断中的应用[J]. 陈鲲,粟芃芃,邱楚英,王雪君,汤恺,秦嘉裕,王子纯,周伯春. 广州大学学报(自然科学版). 2014(02)
[6]巴马小型猪在医学研究中的应用进展[J]. 庞琳琳,张会永,杨关林. 中国实验动物学报. 2014(01)
[7]多次小剂量STZ诱导的成年鼠糖尿病指标的自发恢复[J]. 李如江,邱曙东,田宏,周生伟. 动物学研究. 2013(03)
[8]二甲双胍对STZ诱导小鼠AD样症状的保护作用的研究[J]. 宋金芝,熊慧,丁玲,郑晨,王景景,邓艳秋. 中国药理学通报. 2013(06)
[9]糖尿病患者血脂4项和凝血4项指标的变化及临床意义[J]. 徐立民. 中国伤残医学. 2013(01)
[10]老年糖尿病并发症的临床分析[J]. 何永静. 当代医学. 2012(31)
博士论文
[1]整合转录组及全基因组重测序方法鉴定影响猪脂肪沉积的关键基因及其变异[D]. 邢凯.中国农业大学 2015
[2]糖尿病早期诊断肽类生物标志物候选物的基础研究[D]. 苏锐.北京理工大学 2014
[3]新一代测序在中国青少年起病的成人型糖尿病致病基因检测中的应用[D]. 刘一静.北京协和医学院 2014
[4]中西医治疗2型糖尿病的知识图谱分析[D]. 王淑斌.北京中医药大学 2014
[5]高脂诱导的氧化应激对小鼠肠道菌群改变与炎症反应的影响[D]. 乔艺.江南大学 2014
[6]2型糖尿病相关的代谢组学和生物信息学研究[D]. 黄建华.中南大学 2014
[7]宏基因组数据分析中的统计方法研究[D]. 常秦.山东大学 2012
[8]RNA-seq数据的处理与应用[D]. 王立坤.吉林大学 2012
[9]高血糖动物模型的建立及其影响因素研究[D]. 王竹.中国疾病预防控制中心 2009
硕士论文
[1]2型糖尿病患者患病情况及慢性并发症的相关因素分析[D]. 王月娟.吉林大学 2015
[2]ENU诱变巨结肠小鼠模型的分子机制研究[D]. 糜婷.扬州大学 2014
[3]2型糖尿病与血脂及载脂蛋白水平关系的Meta分析[D]. 马文艳.山西医科大学 2014
[4]巴马香猪血液生理生化指标参考标准的建立及ENU诱变下血液指标异常个体的筛选[D]. 李亮.第三军医大学 2013
[5]高脂高糖诱导巴马小型猪2型糖尿病及肝脏转录组研究[D]. 夏吉瀚.中国农业科学院 2012
[6]版纳微型猪糖尿病模型建立及其PKB的表达研究[D]. 王月婷.南华大学 2012
[7]基于RNA-Seq技术的人转录组分析研究[D]. 陈超.中南大学 2011
[8]超敏C-反应蛋白与糖尿病血管病变及中医证型相关性研究[D]. 张常波.北京中医药大学 2008
本文编号：3677446
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