人成釉蛋白C端肽的表达、纯化及引导牙釉质仿生矿化能力的研究

发布时间：2023-05-27 01:41

　　实验一人成釉蛋白C端肽的原核诱导表达及表达条件的优化目的:对人成釉蛋白C端肽原核表达条件进行优化,以获得高表达量的AMBN-C重组蛋白。方法:1.将pET15b-AMBN-C重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并进行培养;2.当OD值达到0.6时,加入诱导剂0.5mM IPTG,在不同温度、时间下培养,SDS-PAGE电泳检测表达情况,蛋白免疫印记法分析目的蛋白的表达,确定pET15b-AMBN-C重组质粒优化的表达条件。结果:1.将pET15b-AMBN-C重组质粒成功转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,对重组表达菌进行大量培养;2.pET15b-AMBN-C重组质粒优化表达条件的确定:通过分析SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印记结果确定为当OD值达到0.6时,加入0.5mM诱导剂IPTG,20℃条件下培养16h,重组蛋白在沉淀中以包涵体的形式表达。实验二AMBN-C重组蛋白的大量表达、纯化及鉴定目的:获得高表达量、高纯度的重组人成釉蛋白C端肽(AMBN-C)。方法:1.AMBN-C重组蛋白在加入0.5mM诱导剂IPTG,20℃条件下培养16h,以包涵体形式大量表达;...

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
前言
实验一 AMBN-C蛋白的原核诱导表达及表达条件的优化
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
实验二 AMBN-C蛋白大量表达、纯化及鉴定
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
实验三 AMBN-C蛋白引导矿化能力的研究
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
参考文献
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釉基质蛋白引导牙釉质仿生再矿化的研究进展
    参考文献
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本文编号：3823653