透钙磷石涂层浸提液溶入不同浓度锶后联合应用的生物学评价

发布时间：2016-11-14 15:01

本文关键词：透钙磷石涂层浸提液溶入不同浓度锶后联合应用的生物学评价，由笔耕文化传播整理发布。

《河北联合大学》 2014年

透钙磷石涂层浸提液溶入不同浓度锶后联合应用的生物学评价

员丽颖

【摘要】：目的通过体外细胞毒性、增殖实验和动物毒性试验及相关基因表达的检测，对透钙磷石涂层浸提液中溶入不同浓度锶后联合应用的生物学行为进行初步评估，为其实验及临床发展提供了可能。方法本实验采用电化学沉积法对纯钛进行表面改性处理，在其表面制备出透钙磷石涂层，用扫描电子显微镜观察涂层试样的表面形貌，并制备成浸提液，通过向浸提液中加入不同浓度的锶元素，分组并发挥共同作用。将掺有不同含量锶浓度的透钙磷石试样浸提液直接作用于MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞，通过采用CCK-8法，检测各个浓度组的细胞毒性及增殖情况。通过倒置相差显微镜，观察各个浓度组下成骨细胞的生长形态，并综合研究以确定实验分组；通过向SD大鼠体内注射掺有不同含量锶浓度的透钙磷石试样浸提液，行体外急性毒性试验、热原试验以及皮肤刺激实验，，观察注射即刻、24小时、48小时、72小时内实验组和对照组大鼠的呼吸、体温、有无中毒死亡反应及体质量变化，大鼠注射点部位的皮肤有无水肿及红斑，以初步评估生物相容性；通过吉姆萨染色和实时定量PCR技术，观察并检测不同浓度分组下成骨细胞株的生长形态及相关基因的表达情况。数据采用SPSS17.0统计软件处理，所有数据均为均数±标准差（x±s），细胞毒性确定分组试验和PCR实验时各组间的比较采用单因素方差分析，动物毒性试验行重复测量资料的方差分析，P＜0.05有统计学意义。结果1通过改变透钙磷石涂层试样浸提液中锶的含量，所制成的不同含锶浓度组，细胞毒性分级为≤2级，显示了锶的掺入并没有产生明显的细胞毒性，确定实验分组为纯钛浸提液组、透钙磷石涂层浸提液组、掺锶量分别为1％、5％、10％的透钙磷石涂层浸提液组。2急性毒性试验、热原试验和皮肤刺激试验的结果显示，实验组与对照组在试验中的反应大体相同，没有明显的差异，说明该材料的掺锶浸提液对大鼠无明显毒性，无致热作用、无刺激性。能够初步评估该生物材料与锶元素联合应用的作用模式对鼠是安全无毒的，具有良好的生物相容性。3吉姆萨染色结果表明，1％组的成骨细胞形态能发生较多的增殖；实时定量PCR的结果表明，在成骨细胞培养3天后，骨钙素（OCN）在透钙磷石组和1％组均高于其余组，且两者间无显著性差异。骨桥蛋白（OPN）在透钙磷石组和1％组均低于其余组，且两者间无显著性差异；5天后，OCN在掺锶浓度为1％组的成骨细胞的表达量显著高于其余任意组，且其余组之间无显著性差异。OPN在掺锶浓度为5％组和10％组的成骨细胞的表达量显著性高于其余组，透钙磷石组与1％组无显著性差异。结论电化学沉积法制得的透钙磷石涂层试样的浸提液中溶入1％、5％、10％的锶元素共同作用，1％组这个模式作用下的透钙磷石生物材料具有良好的生物相容性，能更好的促进成骨细胞的增殖。

【关键词】：
【学位授予单位】：河北联合大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R783.1
【目录】：

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