牛膝多肽可能通过ERK1/2途径诱导PC12细胞向神经元分化

发布时间：2024-03-24 17:02

　　目的:研究牛膝多肽(ABPP)诱导PC12细胞向神经元分化的作用,初步探讨ABPP作用于PC12细胞的信号转导途径。方法:以体外培养的PC12细胞为研究模型,观察在低血清的情况下不同浓度ABPP(0.25、0.50、1.00μg/ml)诱导PC12细胞发生的形态学改变。采用免疫荧光细胞化学法,观察神经丝蛋白(NF-H)在ABPP诱导分化的PC12细胞中的表达;采用Western blot法观察ABPP(1.0μg/ml)加药后不同时间段(0、6、12h和1、2、3、7d)和不同浓度ABPP(0.25、0.50、1.00μg/ml)加药2 d后对PC12细胞ERK1/2活性的影响,同时应用ERK1/2特异性拮抗剂PD98059与ABPP共培养PC12细胞,分析ABPP对PC12细胞的作用与ERK1/2通路的关系。结果:ABPP处理3 d后,部分PC12细胞开始出现神经元样的形态。随着加药时间延长具有神经元样的细胞逐渐增多,到7 d时,可以见到神经生长因子(NGF)和ABPP处理组PC12细胞的突起都显著增多,能形成网络;14 d时,这种现象愈发显著。加药后7 d和14 d,ABPP各浓度...

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

图1ABPP诱导PC12细胞分化14d的光镜观察结果（×400）

12细胞分化率以及细胞突起长度。结果表明，于加药后7d和14dABPP各浓度组的细胞分化率以及细胞突起长度均明显高于空白对照组（P＜0．01），且存在明显的量效关系（表1）。2．2ABPP诱导PC12细胞神经元性分化的检测7d和14d后采用抗NF-H的抗体，通过免疫A：培养14d....

图2ABPP诱导PC12细胞分化14d的NF-H荧光染色结果

表1ABPP对PC12细胞分化的影响Table1EffectsondifferentiationofPC12cellsbyABPP组别ControlNGFABPP浓度（μg／ml）00．050．250．501．00视野数15151515157d细胞分化率（％）066．05±8．4....

图5PD98059对ABPP（1．0μg／ml）诱导的PC12细胞

2细胞观察ABPP介导的胞内信号转导途径，侧重研究了MAPK／ERK级联途径，以初步探讨ABPP促神经生长、维持神经元存活的可能作用机制。MAPK信号通路是参与细胞生长、发育、分裂以及细胞间功能同步等多种生理功能的最主要的p-ERK1／24244ERK1／24244Control....

图4ABPP（1．0μg／ml）不同作用时间对PC12细胞ERK1／2

03．002．502．001．501．000．500．00p-ERK1／2／ERK1／2*与阴性对照组相比，*P＜0．05。图5PD98059对ABPP（1．0μg／ml）诱导的PC12细胞ERK1／2活性的影响Figure5PD98059resistanceonERK1／2ph....

本文编号：3937767