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整合蛋白质组、转录组和DNA甲基化组调节U937衍生的巨噬细胞从M2极化为M1表型的研究

发布时间:2024-03-13 23:43
  第一部分巨噬细胞培养并对M1和M2细胞表型的体外诱导与鉴定目的:巨噬细胞来源于血液中分化的单核细胞,起到非特异性免疫作用,属于机体免疫系统的重要组成部分,具有识别及呈递抗原、调节免疫进程、清除异物、免疫监视及吞噬等影响机体细胞的生长发育的生物学功能。在机体的特定微环境中,巨噬细胞按照功能及形态可衍生为两种不同的细胞表型,即M1和M2表型,前者属于巨噬细胞的经典激活途径,具有抗原杀伤与抑制肿瘤进展的功效;后者属于巨噬细胞的替代激活途径,其可参与炎症反应、促进血管生成和组织的再造等,在临床上可认为M2型细胞功能属于促进癌细胞的发生发展。本部分研究旨在体外构建巨噬细胞M1和M2这两种极化细胞的模型,为后续对极化巨噬细胞的进一步研究奠定基础。方法:利用佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)刺激U937细胞,然后加入IL-4和IL-13诱导出M2表型,后用脂多糖和IFN-γ诱导出M1表型;使用qPCR分析通过TGF-β,Arg-1和TNF-α表达水平鉴定巨噬细胞的表型;使用蛋白质印迹分析来定量Arg-1和iNOS蛋白质表达;此外,采用酶联免疫吸附测定方法(ELISA)用于检测IFN-γ,T...

【文章页数】:154 页

【学位级别】:博士

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个人简历
摘要
ABSTRACT
前言
    参考文献
第一部分 巨噬细胞培养和M1 和M2 两种细胞表型的体外诱导与鉴定
    一、前言
    二、材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分 巨噬细胞极化过程的结合蛋白质组学、转录组和甲基化间的差异
    一、前言
    二、实验材料与设备
    三、实验流程与方法
    结果
    讨论
    参考文献
第三部分 M1/M2型细胞极化过程中结合蛋白质组学、转录组和DNA甲基化组间的相关性研究
    一、前言
    二、实验材料与设备
    三、实验流程与方法
    结果
    讨论
    参考文献
全文小结
附录
综述
    参考文献
致谢



本文编号:3927745

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