选择性siRNA干扰FCGRⅡA影响THP-1吞噬调理红细胞

发布时间：2023-05-28 07:29

　　为探讨能否通过小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)干扰影响巨噬细胞Fcγ受体介导的吞噬作用,采用FCGRⅡA siRNA转染佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化人单核细胞THP-1,并设NO-TARGET、GAPDH、no-siRNA(1640)为对照。培养48～72h后,用FCM分析CD14+细胞的CD32、CD32b分布,用CD14的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)值作为内参,得到CD32、CD32b相对MFI值;用Western blotting观察CD32a、CD32b的蛋白表达水平;进行单核细胞单层实验(monocyte monolayer assay,MMA),结合流式细胞术分析THP-1中能吞噬调理红细胞的吞噬百分比。采用配对t检验分析FCGRⅡA组与各对照组间的分布差异。Western blotting结果证实,FCGRⅡA组CD32a量明显减少(分别为NO-TARGET组、GAPDH组、1640组的22%、42%、31%),而CD32b不降...

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料与仪器
    1.2 THP-1培养和PMA刺激活化
    1.3 siRNA转染及转染效果评估
    1.4 流式细胞表型分析
    1.5 MMA
    1.6 Western blotting
    1.7 统计学处理
2 结果
    2.1 流式细胞术分析CD32、CD32b的分布
    2.2 Western
    2.3 MMA
3 讨论



本文编号：3824211