pCol(24-38)诱导抗肾小球基底膜肾病大鼠模型的建立

发布时间：2024-03-28 04:12

　　目的以含大鼠Ⅳ型胶原α3链的非胶原区[α3(Ⅳ)NC1]的多肽pCol(24-38)作为抗原建立抗肾小球基底膜(GBM)病大鼠模型,研究抗GBM病的发病机制。方法选择雄性WKY大鼠20只(8～10周龄),体重120～150g,随机分为对照组和抗GBM病模型组,每组10只。抗GBM病模型组使用多肽pCol(24-38)作为抗原,对照组使用多肽pCol(38-52)作为抗原,两组均用完全弗氏佐剂乳化后,于大鼠背部皮下三点注射免疫。免疫后每周定时收集24h尿,测尿蛋白含量,所有动物在免疫后49d处死,取血清,采用肌氨酸氧化酶法检测血清肌酐,脲酶法检测尿素氮浓度,并用间接ELISA法检测血清抗pCol(24-38)抗体相对滴度。取肾脏组织,一部分石蜡切片后行PAS染色及免疫组化染色,另一部分经OCT包埋冷冻切片后用直接免疫荧光法检测IgG在肾小球的沉积情况。结果与对照组比较,抗GBM病模型组的24h尿蛋白含量自第4周开始明显升高[(52.27±10.50)mg/24h vs.(4.87±0.64)mg/24h,P<0.001],之后逐渐上升,至第7周,抗GBM病模型组的24h尿蛋白含量仍...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 多肽合成及免疫
    1.3 生化指标检测及肾脏病理检测
        1.3.1 尿蛋白、血清肌酐及尿素氮检测
        1.3.2 肾小球异常评定
        1.3.3 巨噬细胞浸润情况检测
        1.3.4 间接ELISA法检测血清中抗GBM抗体的水平
        1.3.5评估Ig G在GBM上的沉积情况
    1.4 统计学处理
2 结果
    2.1 两组2 4 h尿蛋白定量比较
    2.2 两组血清肌酐及尿素氮水平比较
    2.3 病理学观察
        2.3.1 肾脏与肾小球异常
        2.3.2 肾小球巨噬细胞浸润情况
    2.4 抗体应答的评估
    2.5 IgG在GBM上的沉积情况
3 讨论



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