用自制单克隆抗体建立检测NGAL的胶体金方法

发布时间：2024-03-17 19:03

　　目的:通过免疫、融合、纯化获得了抗中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的特异性单克隆抗体,并建立了胶体金试纸条的检测。方法:本研究筛选得到5株抗NGAL的单克隆抗体,通过配对测试,1B4和2C6能用于双抗夹心胶体金试纸条的制备。以重组hr NGAL为检测对象,对本试纸条的灵敏度、重复性、稳定性进行了全面评价。结果:本试纸条的灵敏度为5 ng/ml,重复性和稳定性良好,对临床样本的检测与临床结果一致。结论:本研究建立的NGAL免疫胶体金检测方法,灵敏度高,检测时间短,成本低,为普及临床检测早期肾损伤具有重要意义。

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【部分图文】：

图1试纸条组成示意图Fig．1Diagramofpaperstripcomposition

图2胶体金溶液400～600nm扫描图谱Fig．2Scanningmapofcolloidalgoldsolutionat400－

图3金标NGAL抗体2C6偶联物400～600nm扫描图谱Fig．3Scanningmapofanti-NGALantibody2C6

图4胶体金透射电镜图Fig．4Transmissionelectronmicroscopyofcolloidalgold

;2C6效价为1∶5.12×105，亲和力达到4×108，亚型为IgM。2.2金标NGAL抗体2C6偶联物的质量鉴定2.2.1紫外-可见分光光度仪鉴定结果图2、图3分别为胶体金粒子和金标NGAL抗体2C6偶联物在400～600nm波段内经紫外-可见分光光度计扫描的结果，胶体金粒子....

本文编号：3931494