Notch3通过抑制RhoA/ROCK/Hif1α轴调节心脏成纤维细胞增殖、凋亡及向肌成纤维细胞转化

发布时间：2023-11-26 16:46

　　研究背景:心肌纤维化是多种心血管疾病的常见病理过程。心脏成纤维细胞活性异常是心肌纤维化发生发展过程中的关键事件。Notch信号通路在抗心肌纤维化中起着非常重要的作用,但其机制尚未阐明,需要进一步研究。Hif1α和RhoA/ROCK信号通路都已被证明参与心肌纤维化。同时也有研究发现在某些病理生理过程中RhoA/ROCK信号通路是Hif1α的上游途径。在本研究中,我们旨在确定Notch3对心脏成纤维细胞增殖、凋亡及向肌成纤维细胞转化的调控作用及其与RhoA/ROCK/Hif1α信号通路的关系。研究方法:实验分为3个部分。第一部分探讨Notch3对心脏成纤维细胞增殖、表型转化及凋亡的调控作用。分别应用Notch3 siRNA和过表达质粒进行Notch3敲减和过表达血清处理后的成纤维细胞。实验分组:control组,sc notch3组,si notch3组,vector组和ov-N3ICD组。RT-qPCR和western blot检测Notch3 siRNA和过表达质粒转染的效率;应用CCK8和Edu试剂盒检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测total cas...

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

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英汉缩略语名词对照
中文摘要
ABSTRACT
前言
实验设计
    1 原代乳鼠心脏成纤维细胞的提取及实验分组
    2 Notch调节心脏成纤维细胞活性
    3 Notch3 调节RhoA/ROCK/Hif1α信号轴的功能
    4 Notch3 通过RhoA/ROCK/Hif1α信号轴调节心脏成纤维细胞活性
    5 Notch3 通过抑制RhoA/ROCK/Hif1α信号通路改善心肌梗死后心肌纤维化
实验材料与方法
    1 实验准备
    2 主要材料和仪器设备
    3 实验方法
实验结果
    1 心脏成纤维细胞鉴定结果
    2 转染效率检测
    3 Notch3抑制心脏成纤维细胞增殖
    4 Notch3促进心脏成纤维细胞凋亡
    5 Notch3抑制心脏成纤维细胞表型转化
    6 Notch3 调节心脏成纤维细胞中Hif1α,RhoA/ROCK的表达
    7 Hif1α抑制剂和稳定剂效果检测
    8 Hif1α抑制剂可以逆转Notch3 干扰引起的效应
    9 DMOG逆转Notch3 过表达诱导的细胞凋亡增加
    10 Notch3 通过RhoA/ROCK/Hif1α发挥作用
    11 Ad-N3ICD在心肌组织中成功过表达
    12 Notch3抑制心肌梗死后心肌纤维化,改善心肌梗死后心功能
    13 Notch3 通过抑制RhoA/ROCK/Hif1α信号通路发挥抗纤维化作用
讨论
结论
参考文献
文献综述
    心血管系统的重要调控者:Notch信号通路
        1 Notch与先天性心脏病
        2 Notch与心血管系统发育
        3 Notch与动脉粥样硬化
        4 Notch与心肌缺血
        5 Notch与心肌纤维化
        6 Notch与钙化性主动脉瓣疾病
        7 Notch与心律失常
        8 Notch与高血压
        参考文献
    Hif1α与心血管疾病的关系及其他信号通路相互作用
        1 Hif1α与心血管疾病
        2 Hif1α和其他信号通路的交叉
        3 总结
        参考文献
在读期间参与课题
攻读博士期间发表的论文
致谢



本文编号：3868168