石榴皮多酚对慢性低度炎症的调节作用及其分子机制研究

发布时间：2023-11-03 18:52

　　代谢综合征(Metabolic Syndrome,MS)是机体内多种营养成分发生代谢紊乱的一组疾病症候群。MS与心脑血管疾病、2型糖尿病、癌症等慢性疾病密切相关,是糖尿病、心脑血管疾病等高发病率的基础。MS的发病机理从本质上认为是长期慢性炎症的作用,因此,研究炎症在机体和细胞内的作用机理,抑制炎症的发生和发展,对于预防和改善MS等心脑血管疾病具有积极的理论指导意义。石榴含有多种的营养成分,多酚类和黄酮类化合物的种类和含量都很丰富,而石榴皮中的多酚种类繁多且在石榴各部位中含量最高,这些丰富的植物化学物使得石榴皮提取物具有许多生物活性。研究表明,石榴及其提取物具有抗糖尿病、抗氧化、抗菌、抗肥胖、抗癌、降血脂等功效。在炎症方面,已经有研究发现石榴皮提取物具有抑制某些炎性介质和促炎细胞因子分泌的作用,具有一定的抗炎效果,但是其作用机理和主要活性成分尚不清楚。因此,石榴皮多酚(Pomegranate peel polyphenols,PPPs)及其主要成分对炎症的抑制效果及其作用的分子机制有必要进一步深入研究。本论文从体外试验和体内试验两方面入手,首先用脂多糖(lipopolysaccharid...

【文章页数】：114 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
缩写词中英文对照表
第1章 文献综述
    1.1 石榴皮多酚概述
        1.1.1 石榴简介
        1.1.2 石榴皮多酚及其主要活性成分
        1.1.3 石榴皮多酚的生物活性
    1.2 炎症反应
        1.2.1 炎症反应进程
        1.2.2 巨噬细胞
        1.2.3 TLR4与LPS
        1.2.4 炎性介质和促炎细胞因子
        1.2.5 NF-κB通路
        1.2.6 MAPK通路
    1.3 研究意义与研究内容
        1.3.1 研究思路及意义
        1.3.2 研究内容与技术路线
第2章 PPPs对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应的调控
    2.1 材料和仪器
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 主要试剂及耗材
        2.1.3 仪器和设备
        2.1.4 试剂配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 石榴皮多酚纯化物的HPLC分析
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 PPPs对RAW264.7巨噬细胞毒性的测定
        2.2.4 PPPs对RAW264.7巨噬细胞增殖的影响
        2.2.5 试验分组及处理
        2.2.6 PPPs对巨噬细胞ROS生成的影响
        2.2.7 PPPs对巨噬细胞炎症因子分泌的影响
        2.2.8 PPPs对巨噬细胞促炎因子和炎性介质mRNA表达的影响
        2.2.9 数据处理与统计分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 PPPs组成成分的HPLC分析
        2.3.2 PPPs对巨噬细胞活力的影响
        2.3.3 PPPs对LPS诱导巨噬细胞ROS生成的影响
        2.3.4 PPPs对LPS诱导巨噬细胞促炎因子mRNA表达的影响
        2.3.5 PPPs对促炎细胞因子分泌的影响
        2.3.6 PPPs对炎性介质NO/PGE2分泌和iNOS/COX-2 mRNA表达影响
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第3章 PPPs对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应调控的分子机制
    3.1 材料和仪器
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 主要试剂及耗材
        3.1.3 仪器和设备
        3.1.4 试剂配制
    3.2 试验方法
        3.2.1 试验分组
        3.2.2 PPPs对LPS诱导巨噬细胞TLR4和NF-κB mRNA表达的影响
        3.2.3 PPPs对TLR4受体蛋白表达的影响
        3.2.4 PPPs对NF-κB通路的影响
        3.2.5 PPPs对LPS激活巨噬细胞MAPK通路的影响
        3.2.6 Western blot法检测巨噬细胞总蛋白、核蛋白和胞浆蛋白
        3.2.7 数据处理与统计分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 LPS作用时间对巨噬细胞TLR4和NF-κB mRNA表达的影响
        3.3.2 PPPs对LPS诱导巨噬细胞TLR4表达的影响
        3.3.3 PPPs对LPS激活巨噬细胞NF-κB通路的影响
        3.3.4 PPPs对LPS激活巨噬细胞MAPK通路的影响
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第4章 PPPs对高糖高脂诱导的SD大鼠代谢综合征干预研究
    4.1 材料和仪器
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 实验动物及饲料
        4.1.3 主要试剂及耗材
        4.1.4 仪器和设备
        4.1.5 试剂配制
    4.2 试验方法
        4.2.1 实验动物分组及处理
        4.2.2 组织标本采集
        4.2.3 体重、摄食量及肝重指数测定
        4.2.4 大鼠血清生化指标的测定
        4.2.5 大鼠肝脏TC、TG的测定
        4.2.6 大鼠肝脏中相关炎性指标的测定
        4.2.7 大鼠血清中相关炎性指标的测定
        4.2.8 大鼠肝脏病理学检测
        4.2.9 大鼠肝脏相关炎性因子基因表达的测定
        4.2.10 大鼠肝脏炎症通路相关蛋白的Western blot检测
        4.2.11 数据处理与统计分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 PPPs对高糖高脂喂养的大鼠体重和摄食量的影响
        4.3.2 PPPs对高糖高脂喂养的大鼠血脂的影响
        4.3.3 PPPs对高糖高脂喂养的大鼠肝脂和肝重指数的影响
        4.3.4 PPPs对高糖高脂喂养的大鼠血糖、转氨酶和FFA的影响
        4.3.5 PPPs对高糖高脂喂养的大鼠血清CRP、肝脏MPO的影响
        4.3.6 SD大鼠肝脏的外观变化及病理学改变
        4.3.7 PPPs对高糖高脂喂养的大鼠血清及肝脏中细胞炎症因子分泌的影响
        4.3.8 对肝脏中炎性介质和促炎细胞因子的基因表达影响
        4.3.9 PPPs对高糖高脂喂养的大鼠NF-κB-MAPK炎症通路的影响
    4.4 讨论
    4.5 本章小结
第5章 全文结论
    5.1 全文结论
    5.2 本论文的主要创新点
    5.3 论文的不足及展望
参考文献
致谢
攻读博士学位期间研究成果



本文编号：3859700