羽扇豆醇肝靶向脂质体的制备及其抗肝细胞癌研究
发布时间：2023-09-17 16:05
目的:肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,其发病率排在世界第五位,是世界第三高死亡率的肿瘤。目前有多种HCC治疗方案,但是全球HCC患者5年生存率仍然低于5%,其主要原因是手术切除术、化学疗法通常会有严重的副作用。因此,迫切需要寻找和研究出一种安全有效的新药物或药物传递系统来改善以上的弊端,从而到达预防和治疗HCC的目的。国内外研究报道狼毒、京大戟、蒲公英等中药对多种肿瘤模型具有显著抑制作用,而越来越多的研究表明中药中的单体成分(雷公藤红素、斑蝥素)对肿瘤性疾病具有一定的治疗作用。羽扇豆醇是狼毒、京大戟、蒲公英等中药中的主要化学成分,大量研究证实羽扇豆醇在多种肿瘤细胞系和癌症模型中发挥了显著的抗肿瘤作用。但是,由于羽扇豆醇存在不溶于水,生物利用度低等缺点,从而限制了其开发使用。因此,需要一种新型药物载体改善其作用性质以及它的靶向性。本课题首先构建一个具有肝靶向性长循环能力的羽扇豆醇脂质体,然后作用于HepG2细胞研究该制剂的靶向性以及肿瘤相关的蛋白信号通路,最后利用SB(睡美人转座子)介导的高压尾静脉注射转染AKT/c-Met诱导的小鼠HCC模型作为实验动物模型,进一步验证...
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
前言
第一章 处方前研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 脂质体中羽扇豆醇含量测定方法的建立
2.2 羽扇豆醇脂质体包封率测定方法及制备方法的考察
2.3 羽扇豆醇溶解度的测定
2.4 羽扇豆醇普通脂质体影响因素考察
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇含量测定方法的建立
3.2 羽扇豆醇包封率及制备方法的考察结果
3.3 羽扇豆醇溶解度测定结果
3.4 羽扇豆醇普通脂质体影响因素考察结果
4 小结与讨论
第二章 羽扇豆醇肝靶向脂质体制备工艺及表征
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 正交试验法优化羽扇豆醇肝靶向脂质体处方
2.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体冻干工艺的考察
2.3 羽扇豆醇肝靶向脂质体理化性质的考察
2.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体稳定性的考察
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇肝靶向脂质体制备工艺的考察结果
3.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体冻干保护剂考察结果
3.3 羽扇豆醇肝靶向脂质体理化性质的考察结果
3.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体制剂稳定性考察结果
4 小结与讨论
第三章 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内和体外靶向性研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 羽扇豆醇肝靶向脂质体体外靶向性研究
2.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内靶向性研究
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇肝靶向脂质体体外靶向性研究结果
3.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内靶向性研究结果
4 小结与讨论
第四章 羽扇豆醇肝靶向脂质体药代动力学研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 羽扇豆醇标准溶液的配制
2.2 血浆样品的处理
2.3 羽扇豆醇体内分析方法的考察
2.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体在大鼠体内药代动力学研究
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇体内分析方法的建立
3.2 血药浓度测定结果
3.3 平均血药浓度-时间曲线
3.4 统计矩拟合分析
4 小结与讨论
第五章 羽扇豆醇肝靶向脂质体对HepG2 细胞行为学研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 抗体
1.3 实验仪器
2 实验方法
2.1 细胞复苏
2.2 细胞培养
2.3 细胞冻存
2.4 工作液的配制
2.5 细胞增殖抑制实验
2.6 细胞凋亡实验
2.7 细胞周期实验
2.8 羽扇豆醇肝靶向脂质体促细胞凋亡分子机制研究
3 实验结果
3.1 细胞增殖抑制实验结果
3.2 细胞凋亡实验结果
3.3 细胞周期实验结果
3.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体促细胞凋亡分子机制研究结果
4 小结与讨论
第六章 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内药效学研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 抗体
1.3 实验仪器
2 实验方法
2.1 质粒的提取及鉴定
2.2 质粒溶液的配制
2.3 高压尾静脉转染造模
2.4 分组与给药
2.5 小鼠肿瘤检测
2.6 苏木精-伊红(HE)染色
2.7 肝组织中RNA的提取和q RT-PCR(即时聚合酶链式反应)检测
2.8 羽扇豆醇靶向脂质体抗AKT/c-MET诱导HCC分子机制研究
3 实验结果
3.1 质粒酶切实验结果
3.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导FVB小鼠肿瘤生长的影响
3.3 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导小鼠肝脏病理学变化的影响
3.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导小鼠的肝脏肝细胞癌标志物表达水平的影响
3.5 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导的HCC小鼠肝脏的AKT/mTOR以及Ras/MAPK相关蛋白的影响
4 小结与讨论
参考文献
结语
附录1 文献综述
参考文献
附录2 在读博士期间发表的论文
致谢
本文编号：3847755
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
前言
第一章 处方前研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 脂质体中羽扇豆醇含量测定方法的建立
2.2 羽扇豆醇脂质体包封率测定方法及制备方法的考察
2.3 羽扇豆醇溶解度的测定
2.4 羽扇豆醇普通脂质体影响因素考察
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇含量测定方法的建立
3.2 羽扇豆醇包封率及制备方法的考察结果
3.3 羽扇豆醇溶解度测定结果
3.4 羽扇豆醇普通脂质体影响因素考察结果
4 小结与讨论
第二章 羽扇豆醇肝靶向脂质体制备工艺及表征
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 正交试验法优化羽扇豆醇肝靶向脂质体处方
2.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体冻干工艺的考察
2.3 羽扇豆醇肝靶向脂质体理化性质的考察
2.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体稳定性的考察
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇肝靶向脂质体制备工艺的考察结果
3.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体冻干保护剂考察结果
3.3 羽扇豆醇肝靶向脂质体理化性质的考察结果
3.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体制剂稳定性考察结果
4 小结与讨论
第三章 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内和体外靶向性研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 羽扇豆醇肝靶向脂质体体外靶向性研究
2.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内靶向性研究
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇肝靶向脂质体体外靶向性研究结果
3.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内靶向性研究结果
4 小结与讨论
第四章 羽扇豆醇肝靶向脂质体药代动力学研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 实验仪器
2 实验方法
2.1 羽扇豆醇标准溶液的配制
2.2 血浆样品的处理
2.3 羽扇豆醇体内分析方法的考察
2.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体在大鼠体内药代动力学研究
3 实验结果
3.1 羽扇豆醇体内分析方法的建立
3.2 血药浓度测定结果
3.3 平均血药浓度-时间曲线
3.4 统计矩拟合分析
4 小结与讨论
第五章 羽扇豆醇肝靶向脂质体对HepG2 细胞行为学研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 抗体
1.3 实验仪器
2 实验方法
2.1 细胞复苏
2.2 细胞培养
2.3 细胞冻存
2.4 工作液的配制
2.5 细胞增殖抑制实验
2.6 细胞凋亡实验
2.7 细胞周期实验
2.8 羽扇豆醇肝靶向脂质体促细胞凋亡分子机制研究
3 实验结果
3.1 细胞增殖抑制实验结果
3.2 细胞凋亡实验结果
3.3 细胞周期实验结果
3.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体促细胞凋亡分子机制研究结果
4 小结与讨论
第六章 羽扇豆醇肝靶向脂质体体内药效学研究
1 实验材料
1.1 药品及试剂
1.2 抗体
1.3 实验仪器
2 实验方法
2.1 质粒的提取及鉴定
2.2 质粒溶液的配制
2.3 高压尾静脉转染造模
2.4 分组与给药
2.5 小鼠肿瘤检测
2.6 苏木精-伊红(HE)染色
2.7 肝组织中RNA的提取和q RT-PCR(即时聚合酶链式反应)检测
2.8 羽扇豆醇靶向脂质体抗AKT/c-MET诱导HCC分子机制研究
3 实验结果
3.1 质粒酶切实验结果
3.2 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导FVB小鼠肿瘤生长的影响
3.3 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导小鼠肝脏病理学变化的影响
3.4 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导小鼠的肝脏肝细胞癌标志物表达水平的影响
3.5 羽扇豆醇肝靶向脂质体对AKT/c-Met诱导的HCC小鼠肝脏的AKT/mTOR以及Ras/MAPK相关蛋白的影响
4 小结与讨论
参考文献
结语
附录1 文献综述
参考文献
附录2 在读博士期间发表的论文
致谢
本文编号：3847755
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3847755.html
教材专著