基于ERK5调控的巨噬细胞胞葬作用探讨冠心康抗动脉粥样硬化的作用机制
发布时间：2023-04-05 01:40
目的:通过动物实验,观察中药复方冠心康改善ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠的动脉粥样硬化斑块和巨噬细胞胞葬作用相关信号分子的表达情况,特别是从ERK5信号通路调控巨噬细胞胞葬作用来探讨冠心康抗动脉粥样硬化的可能机制。方法:(1)ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠模型评价采用ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠,高脂饮食法喂养24周,建立ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠模型。通过分析小鼠的体重、血脂水平和主动脉病理形态等来评价小鼠模型。(2)组织病理检测为了检测各种干预措施对动脉粥样硬化斑块大小和易损性的影响,取小鼠主动脉根进行如下检测:H&E染色检测斑块大小,油红O染色检测斑块脂质含量,Masson染色检测胶原蛋白含量,免疫组化染色检测斑块巨噬细胞和平滑肌细胞含量,免疫荧光染色检测凋亡细胞含量。(3)实时定量PCR和Western blot为了进一步探讨各种干预措施调控巨噬细胞胞葬功能的作用机制,用RT-q PCR和Western blot技术检测小鼠主动脉...
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略词表
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 ERK5基因对动脉粥样硬化小鼠巨噬细胞胞葬作用的影响
1.实验材料
1.1. 实验动物
1.2. 主要实验试剂、耗材
1.3. 主要仪器和耗材
2.实验方法
2.1. 小鼠基因型鉴定方法
2.2. 小鼠AS斑块模型的建立方法
2.3. 取材和组织保存
2.4. 小鼠的一般情况及外周血脂水平的检测
2.5. 小鼠AS主动脉根晚期斑块病理学的检测
2.6. Western blot检测各组主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子的蛋白表达量
2.7. TRIzol法提取总RNA、反转录和实时定量PCR
2.8. 统计学方法
3.实验结果
3.1. 小鼠基因型的鉴定结果
3.2. ERK5基因敲除对AS小鼠体重的影响
3.3. ERK5基因敲除对AS小鼠血脂的影响
3.4. ERK5基因敲除对AS主动脉根斑块大小的影响
3.5. ERK5基因敲除对AS主动脉根斑块处凋亡情况的影响
3.6. ERK5基因敲除对AS主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子基因表达情况的影响
3.7. ERK5基因敲除对AS主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子蛋白表达情况的影响
4.分析和讨论
4.1. 动脉粥样硬化的认识
4.2. 动脉粥样硬化的形成机制
4.3. 胞葬作用的相关信号分子
4.4. ERK5和巨噬细胞胞葬功能
4.5. ERK5的认识
4.6. ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样模型小鼠
5.小结
第二部分 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠巨噬细胞胞葬作用的影响
1.实验耗材
1.1. 实验动物
1.2. 实验药物
1.3. 主要实验试剂、耗材
2.实验方法
2.1. 实验分组、饲养以及给药方法
2.2. 取材和组织保存
2.3. 小鼠的一般情况及外周血脂水平的检测
2.4. 小鼠AS主动脉根晚期斑块病理学的检测
2.5. Western blot检测各组主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子的蛋白表达量
2.6. TRIzol法提取总RNA、反转录和实时定量PCR
2.7. 统计学方法
3.实验结果
3.1. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠体重的影响
3.2. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠血脂的影响
3.3. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉根斑块大小的影响
3.4. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉根斑块稳定性的评价
3.5. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉根斑块处细胞凋亡情况的影响
3.6. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子各基因表达情况的影响
3.7. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子各蛋白表达情况的影响
4.讨论
4.1. AS易损斑块的产生
4.2. 巨噬细胞胞葬作用防治AS的研究进展
4.3. 中医学对动脉粥样硬化的认识
4.4. 冠心康抗动脉粥样硬化的相关性研究
4.5. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠的血脂异常
4.6. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠的斑块易损性
4.7. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠的巨噬细胞胞葬功能
5.小结
创新点
结论
致谢
参考文献
附录
附录一 文献综述 ERK5介导炎症性疾病的研究进展
参考文献
附录二 已发表文章
附录三
附录四 参与课题及学术会议
本文编号：3782469
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
缩略词表
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 ERK5基因对动脉粥样硬化小鼠巨噬细胞胞葬作用的影响
1.实验材料
1.1. 实验动物
1.2. 主要实验试剂、耗材
1.3. 主要仪器和耗材
2.实验方法
2.1. 小鼠基因型鉴定方法
2.2. 小鼠AS斑块模型的建立方法
2.3. 取材和组织保存
2.4. 小鼠的一般情况及外周血脂水平的检测
2.5. 小鼠AS主动脉根晚期斑块病理学的检测
2.6. Western blot检测各组主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子的蛋白表达量
2.7. TRIzol法提取总RNA、反转录和实时定量PCR
2.8. 统计学方法
3.实验结果
3.1. 小鼠基因型的鉴定结果
3.2. ERK5基因敲除对AS小鼠体重的影响
3.3. ERK5基因敲除对AS小鼠血脂的影响
3.4. ERK5基因敲除对AS主动脉根斑块大小的影响
3.5. ERK5基因敲除对AS主动脉根斑块处凋亡情况的影响
3.6. ERK5基因敲除对AS主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子基因表达情况的影响
3.7. ERK5基因敲除对AS主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子蛋白表达情况的影响
4.分析和讨论
4.1. 动脉粥样硬化的认识
4.2. 动脉粥样硬化的形成机制
4.3. 胞葬作用的相关信号分子
4.4. ERK5和巨噬细胞胞葬功能
4.5. ERK5的认识
4.6. ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样模型小鼠
5.小结
第二部分 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠巨噬细胞胞葬作用的影响
1.实验耗材
1.1. 实验动物
1.2. 实验药物
1.3. 主要实验试剂、耗材
2.实验方法
2.1. 实验分组、饲养以及给药方法
2.2. 取材和组织保存
2.3. 小鼠的一般情况及外周血脂水平的检测
2.4. 小鼠AS主动脉根晚期斑块病理学的检测
2.5. Western blot检测各组主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子的蛋白表达量
2.6. TRIzol法提取总RNA、反转录和实时定量PCR
2.7. 统计学方法
3.实验结果
3.1. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠体重的影响
3.2. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠血脂的影响
3.3. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉根斑块大小的影响
3.4. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉根斑块稳定性的评价
3.5. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉根斑块处细胞凋亡情况的影响
3.6. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子各基因表达情况的影响
3.7. 冠心康对ERK5-MKO/LDLR-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉上巨噬细胞胞葬作用相关信号分子各蛋白表达情况的影响
4.讨论
4.1. AS易损斑块的产生
4.2. 巨噬细胞胞葬作用防治AS的研究进展
4.3. 中医学对动脉粥样硬化的认识
4.4. 冠心康抗动脉粥样硬化的相关性研究
4.5. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠的血脂异常
4.6. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠的斑块易损性
4.7. 冠心康改善ERK5-MKO/LDLR-/-小鼠的巨噬细胞胞葬功能
5.小结
创新点
结论
致谢
参考文献
附录
附录一 文献综述 ERK5介导炎症性疾病的研究进展
参考文献
附录二 已发表文章
附录三
附录四 参与课题及学术会议
本文编号：3782469
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