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MC1R和ASIP基因在马毛色中的协同作用研究及马微卫星13重PCR体系的构建

发布时间:2024-02-14 18:33
  近年来我国马产业发展迅速,许多具有优质血统的纯种马匹被进口至国内用于参加各项赛事和繁育优秀的后代,纯正的血统和不同的毛色直接影响着马匹的价值。以往研究表明,melanocortin-1 receptor(MC1R)和agouti signaling protein(ASIP)是调控哺乳动物毛色的两个最为重要的基因。在对马毛色的研究中,已发现MC1R基因C901T位置的突变可导致栗色毛色的产生,而ASIP基因第二外显子中11 bp的缺失能导致黑色毛色的产生。然而,这两个基因在深浅不同的马毛色中发挥了怎样的精细和协调调控作用尚不清楚。本研究共采集15个品种的709匹毛色由深到浅(黑色、褐骝色、深骝色、骝色、栗色、青色、白色)的马匹毛发样本,检测了所有马匹在MC1R和ASIP基因上特定功能位点的基因分型,通过统计和分析各种基因型组合和分布规律,发现了这两个基因在马毛色深浅变化中可能的重要协同作用关系。为证明新生马驹的血统,各国马业协会通过微卫星亲子鉴定技术为马驹做血统鉴定,并进行登记、颁发护照和建立繁育记录。国际动物遗传学会推荐了17个用于马匹个体识别和亲子鉴定的微卫星位点,分为12个核心位...

【文章页数】:99 页

【学位级别】:博士

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 毛色基因MC1R与 ASIP及其在马属动物中的作用研究进展
        1.1.1 MC1R与 ASIP基因研究进展
        1.1.2 马属动物毛色研究进展
    1.2 微卫星标记研究进展
        1.2.1 微卫星标记概述
        1.2.2 微卫星多重PCR体系研究进展
        1.2.3 微卫星多重PCR技术的其他应用
    1.3 本研究的目的与意义
        1.3.1 MC1R和 ASIP基因在马匹毛色中的协同作用研究
        1.3.2 马微卫星DNA检测多重PCR体系的构建
第二章 MC1R与ASIP基因在马匹毛色中的协同作用研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 毛发样本基因组DNA提取
        2.2.2 PCR产物测序
        2.2.3 MC1R基因分型与毛色关联分析
        2.2.4 ASIP基因分型与毛色关联分析
        2.2.5 MC1R-ASIP基因分型组合与毛色关联分析
    2.3 讨论与小结
        2.3.1 讨论
        2.3.2 小结
第三章 马微卫星DNA检测13重PCR体系的构建
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验方法
        3.1.3 数据分析
    3.2 结果与分析
        3.2.1 样本基因组DNA提取
        3.2.2 多重PCR微卫星引物设计
        3.2.3 多重PCR体系构建与优化
        3.2.4 标准样品微卫星序列克隆测序
        3.2.5 灵敏度试验
        3.2.6 物种特异性试验
        3.2.7 法医类样品试验
        3.2.8 可重复性试验
        3.2.9 Allele ladder
        3.2.10 Stutter分析
        3.2.11 数据分析
    3.3 讨论与小结
        3.3.1 讨论
        3.3.2 小结
第四章 马微卫星DNA检测五重PCR体系的构建
    4.1 材料与方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 样品基因组DNA提取
        4.2.2 多重PCR微卫星引物设计
        4.2.3 多重PCR体系构建与优化
        4.2.4 标准样品微卫星序列克隆测序
        4.2.5 灵敏度试验
        4.2.6 物种特异性试验
        4.2.7 法医类样品试验
        4.2.8 可重复性试验
        4.2.9 Allele ladder
        4.2.10 Stutter分析
        4.2.11 数据分析
    4.3 讨论与小结
        4.3.1 讨论
        4.3.2 小结
第五章 结论、创新点与展望
    5.1 结论
    5.2 创新点
    5.3 展望
参考文献
致谢
攻读博士期间发表的文章



本文编号:3898414

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