黄芩素对Aβ 25-35 诱导PC12细胞损伤的保护作用及机制研究

发布时间：2024-03-01 01:49

　　选题依据:阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是老年痴呆中较为常见的慢性神经退行性疾病。然而,迄今尚无一种理想的药物能够预防和改善AD。黄芩素是中药黄芩中含量较高的一种黄酮类化合物。课题组前期研究发现黄芩素不仅能延长果蝇的寿命,还能够改善D-半乳糖致衰老大鼠和快速老化小鼠SAMP8两种衰老动物模型的认知障碍。然而,黄芩素对Aβ_25-35损伤PC12细胞的保护作用及机制尚不清楚。目的:探讨黄芩素抑制Aβ_25-35聚集及对Aβ_25-35损伤PC12细胞的保护作用,并基于JAK2/STAT1通路及代谢组学技术探讨黄芩素发挥神经保护作用的机制。方法:1.采用Th-T荧光实验,检测黄芩素抑制Aβ_25-35聚集的作用。2.在Aβ_25-35损伤的PC12细胞中,通过测定细胞活力、LDH释放率、细胞凋亡率、NO、IL-8、ROS、MMP、ATP和线粒体复合物I的水平,评价黄芩素的神经保护作用。3.采用Western bolt技术,研究黄芩素对Aβ_25-35

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

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主要缩略词表
中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 立题背景和意义
    1.2 本课题的研究内容、技术路线图及创新点
        1.2.1 研究内容
        1.2.2 技术路线图
        1.2.3 创新点
第二章 文献综述
    2.1 阿尔兹海默症概述
    2.2 AD的发病机制
        2.2.1 Aβ沉积
        2.2.2 Tau蛋白异常学说
    2.3 AD的治疗方法
        2.3.1 化学药物治疗AD
        2.3.2 植物提取物及中药治疗AD
    2.4 黄芩素的药理作用研究进展
        2.4.1 黄芩素抗Aβ聚集的作用
        2.4.2 黄芩素的神经保护作用
        2.4.3 黄芩素的其他作用
第三章 黄芩素抑制Aβ_25-35的聚集
    3.1 引言
    3.2 材料和仪器
        3.2.1 材料
        3.2.2 仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 Aβ_25-35的聚集和黄芩素的抗聚集实验
        3.3.2 黄芩素抗Aβ_25-35聚集的量效关系
        3.3.3 黄芩素解聚预先形成的Aβ_25-35原纤维实验
    3.4 结果
        3.4.1 Aβ_25-35的聚集及黄芩素的抗聚集作用
        3.4.2 黄芩素抗Aβ_25-35聚集的量效关系
        3.4.3 黄芩素对Aβ_25-35聚集纤维的解聚作用
    3.5 小结与讨论
        3.5.1 小结
        3.5.2 讨论
第四章 黄芩素对Aβ_25-35诱导PC12 细胞损伤的保护作用
    4.1 引言
    4.2 材料和仪器
        4.2.1 材料
        4.2.2 仪器
        4.2.3 主要试剂的配制
    4.3 实验方法
        4.3.1 细胞培养
        4.3.2 Aβ_25-35致PC12 细胞损伤模型的建立
        4.3.3 不同浓度黄芩素对PC12 细胞的影响
        4.3.4 实验分组
        4.3.5 MTT法测定细胞活力
        4.3.6 细胞凋亡和乳酸脱氢酶释放率测定
        4.3.7 IL-8和NO的测定
        4.3.8 ROS和 MMP的测定
        4.3.9 ATP和 Complex Ⅰ的测定
        4.3.10 统计分析
    4.4 实验结果
        4.4.1 Aβ_25-35损伤PC12 细胞模型的建立
        4.4.2 黄芩素对PC12 细胞存活的作用
        4.4.3 黄芩素对Aβ_25-35损伤的PC12 细胞存活的影响
        4.4.4 黄芩素对Aβ_25-35诱导PC12 细胞凋亡和LDH的影响
        4.4.5 黄芩素对Aβ_25-35损伤的PC12 细胞IL-8和NO的影响
        4.4.6 黄芩素对Aβ_25-35损伤的PC12 细胞ROS和 MMP的影响
        4.4.7 黄芩素对Aβ_25-35诱导PC12 细胞ATP和 Complex Ⅰ的影响
    4.5 小结与讨论
        4.5.1 小结
        4.5.2 讨论
第五章 黄芩素抑制JAK2/STAT1 通路保护Aβ_25-35诱导PC12 细胞损伤
    5.1 引言
    5.2 实验材料和仪器
        5.2.1 材料
        5.2.2 仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 Western blot
        5.3.2 抗原抗体反应
        5.3.3 蛋白检测及分析
        5.3.4 数据处理
    5.4 结果
        5.4.1 黄芩素对Caspase-3 蛋白表达的影响
        5.4.2 黄芩素对JAK2/STAT1 通路相关蛋白表达的影响
        5.4.3 黄芩素对炎症相关蛋白表达的影响
    5.5 小结与讨论
        5.5.1 小结
        5.5.2 讨论
第六章 基于液质代谢组学研究黄芩素对Aβ_25-35诱导PC12 细胞损伤的保护作用
    6.1 引言
    6.2 实验材料和仪器
        6.2.1 材料
        6.2.2 仪器
    6.3 实验方法
        6.3.1 样本预处理
        6.3.2 备样方法
        6.3.3 液相条件
        6.3.4 质谱条件
        6.3.5 数据处理及统计分析
    6.4 实验结果
        6.4.1 代谢物图谱分析
        6.4.2 生物标志物分析
        6.4.3 代谢通路分析
    6.5 小结与讨论
        6.5.1 小结
        6.5.2 讨论
第七章 总结与展望
    7.1 研究工作总结
        7.1.1 黄芩素抑制Aβ_25-35的聚集
        7.1.2 黄芩素对Aβ_25-35损伤PC12 细胞的保护作用
        7.1.3 黄芩素抑制JAK2/STAT1 通路保护Aβ_25-35诱导PC12 细胞损伤
        7.1.4 基于液质代谢组学研究黄芩素对Aβ_25-35诱导PC12 细胞损伤的保护作用
    7.2 不足和展望
    7.3 学习心得
参考文献
攻读硕士期间取得的研究成果
致谢
个人简况



本文编号：3915253