黑豆皮花青素对C.elegans衰老及阿尔茨海默症的影响

发布时间：2023-04-28 23:46

　　黑豆,我国传统农作物,具有药食两用价值。黑豆除含各种活性物质外,含量最为丰富的是花青素,尤其是黑豆皮。实验室前期成功制备黑豆皮花青素(BSCA)且对其生物活性进行研究,发现BSCA具有很强的抗氧化、抗肿瘤活性。研究表明BSCA具有其他的生物活性如抗炎、降低血脂、防辐射、抗衰老等。衰老是不可避免的生命历程,但是延缓衰老速度是可以实现的。本研究以秀丽隐杆线虫这一经典模式生物为对象,探索了BSCA对衰老以及衰老相关疾病阿尔茨海默症(AD)的影响及其作用机制,主要研究内容和结果如下:1.BSCA的成分鉴定及其对野生型N2线虫生理指标的影响。通过高效液相鉴定发现BSCA的主要成分为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷(D3G)、矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷(Pt3G)、矮牵牛素。BSCA可以延长N2线虫寿命,改善年老线虫运动能力,减少线虫肠道褐脂素积累,但对生殖能力、咽抽速率等生理指标没有影响。2.BSCA延长野生型N2线虫寿命的机制。利用应激(氧化应激、热应激)抵抗、荧光探针、抗氧化酶活性检测试剂盒等方法,探究BSCA调控寿命的机制。结果显示BSCA增强线虫应激抵抗,...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 黑豆皮花青素
        1.1.1 黑豆皮花青素种类
        1.1.2 黑豆皮花青素生物活性
    1.2 衰老
        1.2.1 衰老理论
        1.2.2 与衰老相关疾病-阿尔茨海默症(AD)
    1.3 秀丽隐杆线虫
        1.3.1 秀丽隐杆线虫生理特征
        1.3.2 秀丽隐杆线虫的生命周期
        1.3.3 秀丽隐杆线虫作为抗衰老研究优势
    1.4 胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路
    1.5 研究目的与意义
第二章 BSCA对野生型N2 线虫健康寿命的影响
    2.1 实验材料
        2.1.1 线虫菌株
        2.1.2 实验试剂及仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 培养基及缓冲液的配制
        2.2.2 E.coli OP50 的培养与保存
        2.2.3 秀丽隐杆线虫的培养
        2.2.4 BSCA的提取及鉴定
        2.2.5 BSCA对野生型N2 线虫寿命影响
        2.2.6 BSCA对野生型N2 线虫生殖力影响
        2.2.7 BSCA对野生型N2 线虫运动能力和咽抽速率影响
        2.2.8 BSCA对野生型N2 线虫褐脂素积累影响
        2.2.9 统计学分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 BSCA成分的HPLC分析
        2.3.2 BSCA延长野生型N2 线虫寿命
        2.3.3 BSCA对野生型N2 线虫生殖力、咽抽速率没有影响
        2.3.4 BSCA增加野生型N2 线虫运动能力
        2.3.5 BSCA减少野生型N2 线虫肠道褐脂素积累
    2.4 讨论
第三章 BSCA延长野生型N2 线虫寿命机制
    3.1 实验材料
        3.1.1 线虫株系
        3.1.2 实验试剂及仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 BSCA对应激胁迫下N2 线虫存活的影响
        3.2.2 ROS水平测定
        3.2.3 抗氧化酶活性检测
        3.2.4 BSCA对突变株线虫寿命影响
        3.2.5 线虫总RNA提取及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
        3.2.6 统计学分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 BSCA增加野生型N2 线虫应激抵抗
        3.3.2 BSCA降低野生型N2 线虫体内ROS水平
        3.3.3 BSCA增加野生型N2 线虫体内抗氧化酶活性
        3.3.4 BSCA增加DAF-16 转录活性
        3.3.5 BSCA没有增加突变株线虫寿命
    3.4 讨论
第四章 BSCA对 AD的影响及其机制研究
    4.1 实验材料
        4.1.1 线虫品系
        4.1.2 实验试剂及仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 线虫培养
        4.2.2 寿命实验
        4.2.3 运动能力检测
        4.2.4 瘫痪实验
        4.2.5 CL4176 线虫体内ROS水平测定
        4.2.6 抗氧化酶活性检测
        4.2.7 硫磺素S染色
        4.2.8 线虫RNA提取及qRT-PCR
        4.2.9 统计学分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 BSCA延长CL4176 线虫寿命
        4.3.2 BSCA增强CL4176 年老线虫运动能力
        4.3.3 BSCA减缓CL4176 线虫瘫痪
        4.3.4 BSCA降低CL4176 线虫细胞内ROS水平
        4.3.5 BSCA增加CL4176 线虫体内抗氧化酶活性
        4.3.6 BSCA减少CL4176 线虫中Aβ聚集
        4.3.7 BSCA增加DAF-16 转录活性
    4.4 讨论
总结与展望
参考文献
附录 缩略词
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简况及联系方式



本文编号：3804727