SMYD3在牛着床前胚胎发育及胎儿成纤维细胞生长中作用的研究
发布时间：2022-02-09 02:15
哺乳动物体细胞核移植（Somatic Cell Nuclear Transfer, SCNT）和诱导多能性干细胞（Induced Pluripotent Stem Cells, iPSCs）都证明终末分化的成体细胞可以被重编程为胚胎样多能细胞。但目前SCNT和iPSCs都存在效率低的问题,尤其对于分化状态较高的起始细胞很难重编程为多能性细胞。近来研究表明,在细胞重编程过程中增加转录因子或者表观修饰相关基因的表达可以提高重编程效率。组蛋白甲基化转移酶（Histone Methyltransferase, HMT）包含一大类表观遗传修饰酶,在早期胚胎发育、干细胞多能性维持和分化、细胞重编程等过程具有广泛调控作用。其中SMYD3 （SET and MYND domain-containing protein 3）是组蛋白H3赖氨酸4二甲基化（H3K4me2）和三甲基化（H3K4me3）转移酶；最早在癌细胞中发现,SMYD3能与RNA聚合酶Ⅱ形成转录复合物,激活下游一些癌基因和细胞周期相关基因的表达,在癌细胞增殖、迁移和侵袭中起作用。但目前关于SMYD3在哺乳动物早期胚胎发育及细胞重编程中作用...
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区211工程院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２?ＳＭＹＤ３蛋白在卵母細胞成熟和植入前胚胎中的表达和定位
ＡＴ．Ｉ?ｉｍ?ｎ?ｍｉ＂＂＂＂＂?ｎ?ｎ?１＾１??Ｍ＂圓圓国。Ｉ－国国园??图１．２?ＳＭＹＤ３蛋白在卵母細胞成熟和植入前胚胎中的表达和定位。（Ａ）?ＳＭＹＤ３在卵母細胞成熟中的表??达和定位：（Ｂ）?ＳＭＹＤ３在植入前胚胎中的表达和定位；ＧＶ：生发泡；ＰＭＩ：减数第一次分裂前中期：??ＭＩ：减少第一次分裂中期；ＡＩ－ＴＩ：减數第一次分裂后期和末期：ＭＩＩ：减数第二次分裂中期：图中标尺为??５０｜ｉｍ??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?民ｅｐｒｅｓｅ打ｔａｔｉｖｅ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｉｍｍｕｎｏｓ化ｉｎｅｄ?ｏｏｃｙｔｅｓ?（Ａ）?ａｎｄ?ｅｍｂｒｙｏｓ?（Ｂ）?ｓｈｏｗｉｎｇ?ＳＭＹＤ３?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ??ａｎｄ?ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ?（ｇｒｅｅｎ）．?ＤＮＡ?ｗａｓ?ｓｈｉｎｅｄ?ｗｉ化?ＰＩ?（ｒｅｄ）?ａｎｄ?ＤＡＰＩ?（ｂ山ｅ）．?Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ，?５０?ｊａｍ．?ＧＶ：?ｇｅｒｍｉｎａｌ?ｖｅｓｉｃｌｅ；??ＰＭＩ：?ｐｒｏ阻ｅｔａｐｈａｓｅ?Ｉ；?ＭＩ：?ｍｃｔａｐｈａｓｅ?Ｉ；?Ａｌ－了Ｉ：?ａｎａｐｈａｓｅ?ｌ－ｔｃｌｏｐｈａｓｅ?Ｉ；?Ｍｉｌ：?ｍｃｔａｐｈａｓｅ?Ｕ．??２．?ＧＶ期敲减ＳＭＹＤ３对卵母细胞成熟和胚胎发育的劇向??为了研究＆１优０３在卵母细胞成熟和庇胎发育中的作用，在ＧＶ期裸卵（ｄｅｎｕｄｅｄ?ｏｏｃｙｔｅｓ，??ＤＯＳ）胞质中盈微注射了?５ＭｙＤ３－ｓｉＲＮＡ和Ｎｏｓ－ｓｉＲＮＡ。注射后的卵母细胞在含有０．２ｍＭ??曲ＭＸ的培养液中抑制成熟２４?ｈ，收集所有的卵母细胞通过ＲＴ－ｑＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ??敲减效率。与没有注射组相比
内蒙古大学博±学位论文??０ＣＴ４和ＣＤＸ２的表达相对于对照组在两个时期都没有显著变化（图１．４Ｃ和１．４Ｄ）。??在注射胤化ＺＭ－ｓｉＲＮＡ姐的Ｍｎ卵母细胞中的转录水平显著下降；与卵母细胞成熟相反，??ｓｉＲＮＡ注射导致在受精４８?ｈ后的庇胎中的表达水平上升５倍（图１．４Ｂ）。这??些结果表明在ＧＶ期下调表达能够改变多能基因的表达。??Ａ?ＳＭＹＤ３?目?Ｗ，?ＮＡＮＯＧ?＊??Ｃ?３－｜?＊?Ｃ?１?Ｉ?１??Ｓ?＇—干Ｉ责－?ｎ??ｉｊ?ｎ＊?ｉＨ圓ｉ苗円．」ＩＬ??Ｍｉｌ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐＩＶＦ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐＩＶＦ??Ｃ?ＣＤＸ２?Ｄ?ＯＣＴ４??Ｊ?Ｉ?＇］?下??１１?ｉｉ?ｉｉ?ｌｌｎ＊?ｍ??Ｍｉｌ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐＩＶＦ?Ｍｉｌ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐｌＶＦ??□?Ｎｏｎ巧ｎｓｅ?ｓｉＲＮＡ?Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ??Ｍ?ＳＭＹＤ３ｓｉＲＮＡＩｎｊｅｃｔｔｏｎ??图１．４?ＧＶ期注射湖仍后对ＭＵ期卵母细胞和受精４８ｈ后ＩＶＦ胚胎中转录因子和ｃｍ２??表达的影响。误差棒表示标准偏差，（＊）表示与其他组有显著性差异（ｐ＜〇．〇ｌ）。??巧ｇｕｒｅ?１．４?Ｅ祇ｃｔ?ｏｆ?ＳＭＴＯ３?ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ?ｏｎ?（９Ｃ７Ｖ，ａｎｄ?Ｃ饼口?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｇｒａｐｈｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?巧ｌａｔｉｖｅ??ｍＲＮＡ?ｔｒａｎｓｃ却ｔ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ＯＣＴ４，?ａ打ｄ?ＣＤＸ２
【参考文献】：
期刊论文
[1]Histone modifications dictate specific biological readouts[J]. Anjana Munshi,Gowhar Shafi,Nishat Aliya,Akka Jyothy. 遗传学报. 2009(02)
[2]Silencing SMYD3 in hepatoma demethylates RIZI promoter induces apoptosis and inhibits cell proliferation and migration[J]. Li-Bo Chen, Jun-Yao Xu, Zhen Yang, Guo-Bin Wang Li-Bo Chen, Guo-Bin Wang, Hepatobiliary center, Union Hospital of Huazhong University of Science & Technology, Wuhan 430022, Hubei province, China Jun-Yao Xu, Department of General Surgery, The Second Affiliated Hospital of Sun Yat-seu University, Guangzhou 510120, Guangdong province, China Zhen Yang, Department of integrated surgery, Tongji Hospital of Huazhong University of Science & Technology, Wuhan 430030, Hubei province, China. World Journal of Gastroenterology. 2007(43)
本文编号：3616191
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区211工程院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．２?ＳＭＹＤ３蛋白在卵母細胞成熟和植入前胚胎中的表达和定位
ＡＴ．Ｉ?ｉｍ?ｎ?ｍｉ＂＂＂＂＂?ｎ?ｎ?１＾１??Ｍ＂圓圓国。Ｉ－国国园??图１．２?ＳＭＹＤ３蛋白在卵母細胞成熟和植入前胚胎中的表达和定位。（Ａ）?ＳＭＹＤ３在卵母細胞成熟中的表??达和定位：（Ｂ）?ＳＭＹＤ３在植入前胚胎中的表达和定位；ＧＶ：生发泡；ＰＭＩ：减数第一次分裂前中期：??ＭＩ：减少第一次分裂中期；ＡＩ－ＴＩ：减數第一次分裂后期和末期：ＭＩＩ：减数第二次分裂中期：图中标尺为??５０｜ｉｍ??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?民ｅｐｒｅｓｅ打ｔａｔｉｖｅ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｉｍｍｕｎｏｓ化ｉｎｅｄ?ｏｏｃｙｔｅｓ?（Ａ）?ａｎｄ?ｅｍｂｒｙｏｓ?（Ｂ）?ｓｈｏｗｉｎｇ?ＳＭＹＤ３?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ??ａｎｄ?ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ?（ｇｒｅｅｎ）．?ＤＮＡ?ｗａｓ?ｓｈｉｎｅｄ?ｗｉ化?ＰＩ?（ｒｅｄ）?ａｎｄ?ＤＡＰＩ?（ｂ山ｅ）．?Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ，?５０?ｊａｍ．?ＧＶ：?ｇｅｒｍｉｎａｌ?ｖｅｓｉｃｌｅ；??ＰＭＩ：?ｐｒｏ阻ｅｔａｐｈａｓｅ?Ｉ；?ＭＩ：?ｍｃｔａｐｈａｓｅ?Ｉ；?Ａｌ－了Ｉ：?ａｎａｐｈａｓｅ?ｌ－ｔｃｌｏｐｈａｓｅ?Ｉ；?Ｍｉｌ：?ｍｃｔａｐｈａｓｅ?Ｕ．??２．?ＧＶ期敲减ＳＭＹＤ３对卵母细胞成熟和胚胎发育的劇向??为了研究＆１优０３在卵母细胞成熟和庇胎发育中的作用，在ＧＶ期裸卵（ｄｅｎｕｄｅｄ?ｏｏｃｙｔｅｓ，??ＤＯＳ）胞质中盈微注射了?５ＭｙＤ３－ｓｉＲＮＡ和Ｎｏｓ－ｓｉＲＮＡ。注射后的卵母细胞在含有０．２ｍＭ??曲ＭＸ的培养液中抑制成熟２４?ｈ，收集所有的卵母细胞通过ＲＴ－ｑＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ??敲减效率。与没有注射组相比
内蒙古大学博±学位论文??０ＣＴ４和ＣＤＸ２的表达相对于对照组在两个时期都没有显著变化（图１．４Ｃ和１．４Ｄ）。??在注射胤化ＺＭ－ｓｉＲＮＡ姐的Ｍｎ卵母细胞中的转录水平显著下降；与卵母细胞成熟相反，??ｓｉＲＮＡ注射导致在受精４８?ｈ后的庇胎中的表达水平上升５倍（图１．４Ｂ）。这??些结果表明在ＧＶ期下调表达能够改变多能基因的表达。??Ａ?ＳＭＹＤ３?目?Ｗ，?ＮＡＮＯＧ?＊??Ｃ?３－｜?＊?Ｃ?１?Ｉ?１??Ｓ?＇—干Ｉ责－?ｎ??ｉｊ?ｎ＊?ｉＨ圓ｉ苗円．」ＩＬ??Ｍｉｌ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐＩＶＦ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐＩＶＦ??Ｃ?ＣＤＸ２?Ｄ?ＯＣＴ４??Ｊ?Ｉ?＇］?下??１１?ｉｉ?ｉｉ?ｌｌｎ＊?ｍ??Ｍｉｌ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐＩＶＦ?Ｍｉｌ?Ｅｍｂｒｙｏｓ?４８ｈ?ｐｌＶＦ??□?Ｎｏｎ巧ｎｓｅ?ｓｉＲＮＡ?Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ??Ｍ?ＳＭＹＤ３ｓｉＲＮＡＩｎｊｅｃｔｔｏｎ??图１．４?ＧＶ期注射湖仍后对ＭＵ期卵母细胞和受精４８ｈ后ＩＶＦ胚胎中转录因子和ｃｍ２??表达的影响。误差棒表示标准偏差，（＊）表示与其他组有显著性差异（ｐ＜〇．〇ｌ）。??巧ｇｕｒｅ?１．４?Ｅ祇ｃｔ?ｏｆ?ＳＭＴＯ３?ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ?ｏｎ?（９Ｃ７Ｖ，ａｎｄ?Ｃ饼口?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｇｒａｐｈｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?巧ｌａｔｉｖｅ??ｍＲＮＡ?ｔｒａｎｓｃ却ｔ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ＯＣＴ４，?ａ打ｄ?ＣＤＸ２
【参考文献】：
期刊论文
[1]Histone modifications dictate specific biological readouts[J]. Anjana Munshi,Gowhar Shafi,Nishat Aliya,Akka Jyothy. 遗传学报. 2009(02)
[2]Silencing SMYD3 in hepatoma demethylates RIZI promoter induces apoptosis and inhibits cell proliferation and migration[J]. Li-Bo Chen, Jun-Yao Xu, Zhen Yang, Guo-Bin Wang Li-Bo Chen, Guo-Bin Wang, Hepatobiliary center, Union Hospital of Huazhong University of Science & Technology, Wuhan 430022, Hubei province, China Jun-Yao Xu, Department of General Surgery, The Second Affiliated Hospital of Sun Yat-seu University, Guangzhou 510120, Guangdong province, China Zhen Yang, Department of integrated surgery, Tongji Hospital of Huazhong University of Science & Technology, Wuhan 430030, Hubei province, China. World Journal of Gastroenterology. 2007(43)
本文编号：3616191
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