针对猪流行性腹泻病毒感染细胞的核酸适配体的筛选及二氧化锰纳米片抗病毒研究

发布时间：2024-03-09 13:21

　　猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)是严重危害养猪业的两种典型病毒,给我国乃至全世界养猪业造成重大经济损失。建立病毒新的检测方法、发展新型抗病毒手段,对于控制病毒的流行具有重要的意义。本论文采用细胞-指数富集的配体系统进化技术(Cell-SELEX)成功筛选出针对PEDV感染细胞的核酸适配体候选物;研究了二氧化锰(Mn O₂)纳米片对PEDV及PRV的抑制效果,具体内容如下:利用Cell-SELEX技术,成功筛选出针对猪流行性腹泻病毒感染非洲绿猴肾细胞(VERO)的核酸适配体候选物。在合成寡核苷酸文库、上游引物及下游引物的基础上,通过琼脂糖凝胶电泳表征方法对初始ss DNA序列进行了鉴定,并利用间接免疫荧光方法探究了PEDV病毒感染VERO合适的时间和剂量。以PEDV感染的VERO细胞为正筛细胞,以正常的VERO细胞为反筛细胞,经过13轮筛选获得了核酸适配体富集文库,借助NUPACK软件对第11轮文库高通量测序结果中的优选序列进行分析和结构预测,最终得到3条核酸适配体候选物。研究结果对PEDV感染VERO细胞表面标志物的发现、PEDV的早期诊断及...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1PEDV基因组及结构示意图（王兴叶2018）

针对猪流行性腹泻病毒感染细胞的核酸适配体的筛选及二氧化锰纳米片抗病毒研究3图1.1PEDV基因组及结构示意图（王兴叶2018）Fig.1.1GenomeandschematicrepresentationofPEDV2.1.3PEDV的基本性质PEDV能够对人的红细胞或者鼠、牛、....

图1.2PRV结构示意图（Pomeranzetal2005）

华中农业大学2020届硕士研究生学位（毕业）论文82.2.2PRV的病毒学分类及分子结构PRV归属于疱疹病毒目（Herpesvirales），疱疹病毒科（Herpesviridae），水痘病毒属（Varicellovirus）成员，是宿主为脊椎动物的线性双股DNA病毒（张莹等20....

图1.3核酸适配体特异性识别靶标示意图（Stoltenburgetal2007）

华中农业大学2020届硕士研究生学位（毕业）论文123核酸适配体3.1核酸适配体及SELEX技术简单介绍1990年，Ellington等（EllingtonandSzostak1990）通过对有机染料的初始文库进行体外筛选获得了能特异性识别小分子的核酸适配体（aptamer）。同....

图1.4Cell-SELEX技术筛选核酸适配体的流程图（Sefahetal2010）

华中农业大学2020届硕士研究生学位（毕业）论文14图1.4Cell-SELEX技术筛选核酸适配体的流程图（Sefahetal2010）Fig.1.4RoadmapofaptamerselectionbyCell-SELEXtechnology3.2.2Cell-SELEX技术的....

本文编号：3923478