利用转座子构建细菌突变体的原理及应用

发布时间：2024-02-15 10:08

　　转座反应在生物体的抗逆应激性反应、效应因子迁移等过程中扮演着重要角色,越来越多的转座元件被发现并应用于未知功能基因的发现、生物遗传特性与功能等研究。Tn3、Tn5、Tn10、Tn7来源于原核生物,Mariner来源于真核生物,其中Tn3属于TnA家族,采用复制型转座,其余采用非复制型转座。实际应用中,相对于Tn3、Tn5存在插入热点区域,Mariner和Tn10具有更高的插入频率和随机性,且得到更为广泛的应用。详细总结了广泛应用于芽孢杆菌、假单胞菌、黄单胞菌、劳尔氏菌等细菌研究领域的Tn3、Tn5、Tn10、Tn7、Mariner类转座子的分类、结构特点、转座过程和调控机制,以及最新的应用进展,为后续研究者提供了理论说明和应用建议。

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【部分图文】：

图1转座子的分类

转座子分为编码蛋白质的DNA类转座子和反转录类转座子,IS、复合型转座子Tn、TnA类、Muphage存在于原核生物。其中最先被鉴定出的转座元件是细菌中的插入序列IS。IS能独立发挥转座,例如IS1、IS2、IS4、IS5、IS10R、IS50R、IS903。其中IS1、IS....

图2转座子的分子结构*

Tn5最早发现于大肠埃希菌(Escherichiacoli),含编码卡那霉素、博来霉素、链霉素等抗性基因,末端含IS50反向重复序列,IS50R转录翻译转座酶Tnp和抑制蛋白Inh,而IS50L由于一个氨基酸位点突变而无法转录,但形成抗性基因的启动子序列。IS50R/IS....

图3Tn3、Tn5、Tn7、Tn10和Mariner转座模型*

Tn7使用杂聚肽转座酶进行剪切-粘贴转座,在TnsABCDE5个蛋白中,TnsC主要为互作蛋白,TnsA-TnsB以核酸内切酶复合体的形式进行定位,二者协作直接进行目标DNA的切割反应,以形成线性转移产物,随后通过TnsC的互作,结合TnsD或TnsE,形成TnsABC+....

本文编号：3899581