毛白杨线粒体抗坏血酸过氧化物酶（PtomitAPX）的功能分析

发布时间：2024-02-15 04:39

　　植物的线粒体对新陈代谢和多种生物合成途径都发挥重要作用,其中氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)途径能够满足植物细胞生长发育的需求。在这过程中,电子依托分布于线粒体内膜中的一系列呼吸复合物(Ⅰ-Ⅳ)参与氧化还原反应完成电子传递,并释放能量驱动ATP合成。但是由于呼吸复合物Ⅰ-Ⅲ存在的电子泄漏现象,电子传递所消耗的氧的0.2%-2%并没有形成H20而是形成了活性氧(reactive oxygen species,ROS),例如超氧化物阴离子和过氧化氢(H2O2)等。抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)就是植物细胞中清除H2O2的主要酶之一。拟南芥的研究表明线粒体和叶绿体的ROS水平是通过双定位于这两个细胞器的叶绿体基质型抗坏血酸过氧化物酶(sAPX)共同调控的,此外还有细胞质抗坏血酸过氧化物酶(cAPX)通过交叉保护机制予以辅助。然而,木本植物中线粒体的ROS水平调控机制还不够清晰。本研究通过讨论毛白杨PtomitAPX亚细胞结构定位的特异性;qRT-PCR分析了PtomitAPX的表达模式;观察转基因植株和细胞...

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【部分图文】：

图２．１多物种ＡＰＸ信号肽蛋白二级结构分析的比对分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｍｕｌｔｉ－ｓｐｅ?

体信号肽则含有二者特征但并不显著（Ｂｈｕｓｈａｎ?ｅ／ｏ／．，２００６；?Ｇｅ?ｅ／ｆｌ／．，２０１４）。??在本研究的结果中，ｃｈｌＡＰＸ（ｓＡＰＸ和ｔＡＰＸ）信号肽Ｎ端前１９个氨基酸富含丝??氨酸和脯氨酸，而Ｐ／〇／ｗ以则富含正电荷氨基酸（图２．１）。此外，Ｐｔｏ／ｎ／Ｗ／ｌ....

图２．２多物种ＡＰＸ进化树分析??进化树分析使用到的植物包括拟南芥、水稻、玉米、卷柏、衣藻、团藻、胶球藻、绿色鞭毛藻、??微胞藻、芜青、大豆、毛果杨、毛白杨

Ｐ／ｏｗ／Ｍ／Ｗ和Ｐ／ｏＭＰＸ在植物受到Ｈ２０２、ＮａＣｌ、高温、干旱、低温以及强光胁??迫时的表达模式通过ｑＲＴ－ＰＣＲ进行了分析。Ｈ２０２、ＮａＣｌ以及高温胁迫使??的表达量显著上升（图２．３Ａ），而Ｐ／ｆｗｄＰＸ和Ｐ／ｏＭＰＸ则显著下降（图２．３Ｂ，Ｃ）。此??夕卜，高强度....

图２．３?和／表达模式的分析??Ａ，非生物胁迫下的表达模式；Ｂ，非生物胁迫下／ＶｏＭＰＪＴ的表达模式；Ｃ，非生物胁??迫下Ｐ／ｏ以ＰＺ的表达模式

ｇｈｔ?Ｃｏｌｄ?Ｈｉｇｈ?ｌｉｇｈｔ??、翁??图２．３?和／表达模式的分析??Ａ，非生物胁迫下的表达模式；Ｂ，非生物胁迫下／ＶｏＭＰＪＴ的表达模式；Ｃ，非生物胁??迫下Ｐ／ｏ以ＰＺ的表达模式。＊＊表示Ｐ＜０．０１的极显著差异；＊表示Ｐ＜０．０５的显著差异。??Ｆｉｇｕｒｅ?２....

图２．４密度梯度离心法分离高纯度线粒体??Ａ，第一步密度梯度离心：顺序滴加４０％?ＭＴＥ溶液（２７－３０层）、２３％?ＭＴＥ溶液（１０－２６层）和??

结构的污染问题。第一步密度梯度离心后，线粒体样品出现在２３％和４０％蔗糖溶液??的交界处，随后本研究将整个离心柱以ｌｍＬ为单位进行分层的标志酶活性检测，结??果如图２．４?Ａ所示，线粒体聚集在１８－３０层，但在这之中存在过氧化物酶体的污染（检??测到过氧化氢酶活性），此外，碱性焦....

本文编号：3899220