一株无Sf-RV污染的Sf9细胞株生长特性及其在杆状病毒表达系统中的应用

发布时间：2024-01-22 08:57

　　从雌性草地夜蛾蛹中分离得到的昆虫细胞系(Sf)在杆状病毒昆虫细胞系统(Baculovirus-insect cell system,BICS)中被广泛用作重组蛋白生产的宿主。然而,2014年Ma H等发现该细胞系受到一种病毒的污染,该病毒现在被称为新弹状病毒(Sf-rhabdoviru,Sf-RV)。这提出了一个潜在的安全问题,可能对作为商业重组蛋白生产平台的BICS产生不利影响。因此,我们筛选一种Sf-RV阴性的Sf9细胞株,命名为Sf9-ZY,逆转录-聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测表明,在连续培养的25代过程中,Sf9-ZY细胞没有检测到Sf-RV。Sf9-ZY细胞的一般特性,包括平均生长率、直径,与Sf9细胞基本相同;Sf9-ZY细胞和Sf9细胞产生感染性杆状病毒水平相当;Sf9-ZY和Sf9细胞培养重组杆状病毒表达重组蛋白水平相当。上述结果表明,Sf9-ZY细胞可作为改良的替代宿主,以规避与使用Sf-RV污染的Sf9细胞制造重组蛋白有关的潜在安全危险。

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【文章目录】：
材料与方法
    1细胞、重组杆状病毒及试剂
    2 Sf-RV检测
    3细胞增殖特性
    4杆状病毒增殖水平
    5 HPV16型和HPV58型L1蛋白表达水平对比
结果
    1 Sf-RV检测
    2细胞增殖特性
    3杆状病毒增殖水平
    4 HPV16型和HPV58型L1蛋白表达量对比
讨论



本文编号：3882576