新塔花的快速繁殖与细胞悬浮培养体系的建立

发布时间：2020-06-21 15:52

【摘要】：新塔花(Ziziphora bungeana Juz.)属唇形科(Labiatae)新塔花属,为新疆特有药用植物,具广泛药用价值,黄酮类是其主要药效成分。利用离体繁殖获得新植株或次生代谢产物的技术是目前研究的一个重要方向,其主要应用途径包含植物的快繁与细胞的悬浮培养。本研究以新塔花为对象,以无菌苗的茎段为材料,通过诱导并继代增殖腋芽、愈伤组织,胁迫条件下分析细胞的生长与总黄酮含量变化,初步对新塔花的快速繁殖与细胞悬浮培养体系进行研究,为新塔花规模化快速生产提供技术支持,同时为其在细胞水平上大量生产有效药用次生代谢产物奠定基础,提供新的药源途径。主要研究结果如下:(1)筛选适合新塔花种子萌发的基质为MS培养基;2%NaClO消毒时间为4 min;GA_3、6-BA、NAA最佳浓度分别为:200 mg·L~(-1)、0.8 mg·L~(-1)、0.25 mg·L~(-1),萌发率均显著性提高(P0.05),分别为50.44%、55.56%、57.78%。(2)确定幼嫩茎段诱导腋芽的最适培养基为MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA,平均诱导率为90.47%;适宜芽增殖培养基为MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+0.3 mg·L~(-1) GA3+35 g·L~(-1)蔗糖,20 d增殖系数达1.95;最佳诱导根生长培养基为1/2MS+0.5 mg·L~(-1) NAA+0.2%AC,生根数量达3.5,组培苗20 d高达4.5 cm。移栽混合基质(营养土:珍珠岩:蛭石=1:1:1)中组培苗成活率为80.45%。(3)适宜愈伤组织诱导的材料为茎段,切割环境为湿润;最佳诱导培养条件为MS+1 mg·L~-11 6-BA+1 mg·L~-11 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖;适宜增殖继代的培养基为MS+0.6 mg·L~-11 6-BA+0.9 mg·L~-11 2,4-D+0.5 mg·L~-11 GA_3+0.15 mg·L~-11 AgNO_3;适宜光照强度为4.5 klux;NaCl对愈伤增殖影响显著(P0.05),而对总黄酮影响不著性(P0.05);SA对愈伤增长与总黄酮积累效果显著(P0.05);不同浓度MeJA对愈伤鲜重量影响显著(P0.05),而对总黄酮含量效果不显著(P0.05)。(4)以疏松的淡黄绿色愈伤组织为材料,确定悬浮培养最佳接种量为0.1g·mL~(-1),适宜激素配比为MS+1.5 mg·L~-11 2,4-D+1 mg·L~-11 NAA+0.2 mg·L~-11 6-BA+1mg·L~-11 KT,悬浮细胞与总黄酮含量显著提高(P0.05);最佳蔗糖浓度为30 g·L~(-1);最佳转速为100 r/min;最佳继代天数为6~7 d;10 uM SA显著性促进悬浮细胞的生长与总黄酮的积累(P0.05);但高浓度SA有显著性抑制作用(P0.05);10 uM MeJA促进细胞的生长(P0.05)与总黄酮含量的积累(P0.05)。
【学位授予单位】：新疆大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S567.19
【图文】：

新疆大学硕士研究生学位论文物，在多种植物中含有，如裸子与双子叶植物[40]，其具有广泛的生物活性而被用于各项研究；具有较好抗氧化作用[41]，也具有多种药理作用，如有利于心脑血管[42, 43]、益胆益肝益肾[44]、有效清除自由基[45]、抗菌抑癌[46]、抵御过敏、消除炎症[46]、抵抗病毒、抗凝血[44]、抗高血压与血管壁扩张[47]等，且每种药用用途都可能与各种多而复杂的机理相关。1.3.3 黄酮类物质的合成途径在植物体内黄酮类化合物合成途径归为苯丙烷代谢合成途径，属于次生代谢合成过程之一，其具体合成过程如图 1 所示[48]。

新疆大学硕士研究生学位论文与新的思路，对未来利用合成生物学生产新塔花黄酮类物质及其工业化重要意义。究技术路线如图 1-2 所示：外植体的选择愈伤组织的诱导与分化新塔花无菌苗的获得

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张国良;李晓红;;芳香新塔花的研究进展及前景分析[J];农业与技术;2014年10期

2 苏飞亚;吴新华;孔珊;;新塔花的安全试验和毒性研究[J];新疆中医药;1993年03期

3 沙爱龙;孟庆艳;郝海燕;;芳香新塔花茶对小鼠镇静催眠、生长发育及免疫器官指数的影响研究[J];中南民族大学学报(自然科学版);2016年03期

4 沙爱龙;阿卜杜吉力力·麦麦提;孟庆艳;;维药芳香新塔花和小新塔花对小鼠离体十二指肠收缩性影响的比较[J];江苏农业科学;2012年05期

5 丁玲;孟庆艳;彭镰心;刘圆;;芳香新塔花和小新塔花的红外指纹图谱研究[J];西南民族大学学报(自然科学版);2012年02期

6 邢思雷;张丕鸿;计巧灵;贾红丽;王雪华;;新疆芳香和帕米尔新塔花精油组成及其抗氧化的研究(英文)[J];食品科学;2010年07期

7 杨伟俊;顾政一;满尔哈巴;赵军;石峰;何江;;芳香新塔花中黄酮类成分的研究[J];时珍国医国药;2011年02期

8 申静;刘冲;杨伟俊;陈文;;芳香新塔花总黄酮抗氧化活性研究[J];北方园艺;2018年09期

9 杨伟俊;何江;满尔哈巴;阿不都沙拉木;毛燕;于睿;;芳香新塔花药材质量标准的研究[J];中国实验方剂学杂志;2010年10期

10 杨小菊;李宁;孟大利;李巍;李铣;;芳香新塔花化学成分的分离与鉴定[J];沈阳药科大学学报;2008年06期

相关会议论文 前2条

1 梁鹏;班小泉;汤俊;黄博;范建伟;王有为;;维药新塔花挥发油成分的GC-MS分析[A];中华中医药学会第九届中药鉴定学术会议论文集——祝贺中华中医药学会中药鉴定分会成立二十周年[C];2008年

2 杨伟俊;何江;刘冲;地力努尔·吐尔逊江;张兴岳;张瑞萍;廖晶晶;;新疆特色资源新塔花的药用开发研究[A];海峡两岸暨CSNR全国第十届中药及天然药物资源学术研讨会论文集[C];2012年

相关硕士学位论文 前5条

1 马丽娜;新塔花的快速繁殖与细胞悬浮培养体系的建立[D];新疆大学;2019年

2 杨小菊;芳香新塔花的化学成分研究[D];沈阳药科大学;2008年

3 廖晶晶;芳香新塔花总黄酮分离纯化及滴丸剂的制备工艺 研究[D];新疆医科大学;2012年

4 李国柱;HPLC在线筛选芳香新塔花中抗氧化活性成分及其化学成分的分离与活性研究[D];塔里木大学;2015年

5 王红丽;新疆地产药材新塔花规范化生产的初步研究[D];新疆医科大学;2015年

本文编号：2724285