球孢白僵菌的复合诱变及其防冶油茶害虫研究
发布时间：2020-04-01 20:49
【摘要】：白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillemin是一种半知菌类的广谱性昆虫病原真菌。它寄主的范围非常广泛,并且具有很强的感染能力、很好扩散流行性、不污生态染环境的特点,同时它生产简单,原料非常经济。随着过度的使用化学农药,环境问题越来越严重,作为主要的生防菌剂之一,白僵菌在生产应用中越来越受到人们的重视。白僵菌是一种真菌性杀虫剂,为了提高其杀虫效果,本文针对球孢白僵菌BbIII进行复合诱变选育、诱变株发酵条件优化、及其林间防效研究。主要结果如下:(1)采用紫外线和微波对球孢白僵菌BbIII进行复合诱变,通过产孢量、几丁质酶活指标筛选我们得到3株优良菌株,测试了 3株优良菌株对油茶象甲试虫的毒力效果。筛选获得最佳诱变菌株CB-27,其产孢量是原菌株的2.81倍,几丁质酶活力也明显高于原菌株,高活力几丁质酶产生菌株CB-27对油茶象甲均表现出了一定的致病力,随着处理时间的延长,校正死亡率逐渐真大。处理第6天时,CB-27菌株对油茶象甲的校正死亡率达86.83%,明显高于出发菌株。(2)优化球孢白僵菌CB-27发酵的条件。用单因素实验的方法测出其各个因子的最适范围。根据最佳筛选实验确定的各因素的作用效果设计了最陡爬坡实验,对玉米粉浓度、含水量、接种量、发酵温度进行四因素五水平响应分析。通过响应面分析,优化球孢白僵菌CB-27固态发酵的条件,得出固态发酵最佳条件是:玉米粉8.21 g·L-1,水分38.47%,接种量10.31%,发酵温度25.35℃,在此条件下球孢白僵菌CB-27的产孢量达到了11.853(×1010Spores·g-1),较优化前提高了 3倍。(3)通过林间施菌、笼套法测定防治效果,调查防治后油茶植株的虫口数和油茶果新增受害率,综合评价白僵菌林间防治油茶象甲的效果。通过测定菌株BbIII、紫外诱变株Uv7和复合诱变株CB27的林间防效,进一步确定了复合诱变菌株CB27对油茶虫害(油茶象甲)具有高效的防治作用。结果表明在施菌6天后,C3处理(108个·ml-1的CB27)的油茶象甲死亡率达到了 83.4%,防治效果为79.9%,虫口减退率为81.7%。防治后各个处理的虫口数和油茶果新增受害明显下降,其中C1、C2、C3下降最多,处理以后的虫口数分别是6.1、4.1、4.3头·株-1;其中C1、C2和C3在防治期间的新增受害率为5.2%、5.3%和5.0%,均远低于对照组CK的15.2%,说明防治效果十分显著。其中相同浓度下防治效果和感染率都存在这样的关系:CBA,在都使用CB27的情况下,C3(108个·ml-1)C2(107个·ml-1)C(106个·ml-1),进一步说明了复合诱变后的菌株对油茶虫害(油茶象甲)具有更好的防治作用。
【图文】：
固体培养基的上面，每样做３个皿，８ｄ后对｜Ｗ落数进ｆｊ？统计，取它们的平均位逡逑来计算诱变致死率，并用孢子计数法检测产孢能力，ｉｈ算出正突变率，诱变时间逡逑ｂ致死率还有正突变率之间的关系见图２．１。逡逑表２．１紫外诱变时间对致死率和正突变丰的影响逡逑Ｔａｂｌｅ２．１邋Ｅｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆ邋ＵＶ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋Ｐｏｓｉｔｉｖｅ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｒａｔｅ逡逑照射时间（分）逦５逦１０逦１５逦２０逦２５逦３０逡逑致死率（％）逦４０．５逦４６．３逦５１．２逦７８．６逦８２．２逦９２．６逡逑．ｌｌ．：突变率．（％）逦１６．７逦１９．６逦２２．３逦２７．６逦２０．４逦１０．７逡逑１００逡逑ａ？邋９０逡逑８０邋逦逦逦逡逑幺邋７0逡逑＾６０逡逑－４０逦９ｒ－逡逑Ｓ邋３０逡逑￥邋２０邋逦逦逦逦？逡逑、一邋１０逡逑０逡逑０逦５逦１０逦１５逦２０逦２５逦３０逦３５逡逑时间（ｍｉｎ邋）逡逑一？一致死率（％）逦—？一正哭变率（％）逡逑图２．１紫外诱变时间对致死率和ｉＨ突变率的影响逡逑Ｆｉｇ２．邋ｌＥｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆＵＶ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋ｌ＾ｓｉｔｉｖｃ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｒａｔｅ逡逑１９逡逑
３＿２．３不同的接种量对ＣＢ２７产抱量的影响逡逑液体接种量和产孢量相关性并不是那么明显，以固体培养料的１５％的接种量逡逑为最佳（见图３．３），其产孢量稍稍高于其他的接种量，整体情况来看相对都是逡逑比较平稳的。产生这现象的原因有以下两点：一是接种量太少无法满足其生长所逡逑Ｖ后需求，？也有可能是接种量太多孢子密度太大，，从而导致空问的不足，也会影响逡逑孢Ｔ的萌发生长。这里选择最佳接种量为１５％。逡逑＿邋｜｜｜逡逑Ｉ．．Ｉ邋ｌｌ逡逑１０逦１５逦２０逦２５逦３０逡逑接种量／（％｝逡逑图３．３．接种量浓度对ＣＢ２７产孢量的影响逡逑Ｆｉｇ３．３．Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ邋ｏｎ邋ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ＣＢ２７逡逑３．２．４不同的发酵温度对ＣＢ２７产孢量的影响逡逑在前面几步最佳条件下，然后不Q嫷奈露冉蟹⒔停峁迹常矗５卞义戏⒔偷奈露鹊陀冢玻
本文编号：2610932
【图文】：
固体培养基的上面，每样做３个皿，８ｄ后对｜Ｗ落数进ｆｊ？统计，取它们的平均位逡逑来计算诱变致死率，并用孢子计数法检测产孢能力，ｉｈ算出正突变率，诱变时间逡逑ｂ致死率还有正突变率之间的关系见图２．１。逡逑表２．１紫外诱变时间对致死率和正突变丰的影响逡逑Ｔａｂｌｅ２．１邋Ｅｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆ邋ＵＶ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋Ｐｏｓｉｔｉｖｅ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｒａｔｅ逡逑照射时间（分）逦５逦１０逦１５逦２０逦２５逦３０逡逑致死率（％）逦４０．５逦４６．３逦５１．２逦７８．６逦８２．２逦９２．６逡逑．ｌｌ．：突变率．（％）逦１６．７逦１９．６逦２２．３逦２７．６逦２０．４逦１０．７逡逑１００逡逑ａ？邋９０逡逑８０邋逦逦逦逡逑幺邋７0逡逑＾６０逡逑－４０逦９ｒ－逡逑Ｓ邋３０逡逑￥邋２０邋逦逦逦逦？逡逑、一邋１０逡逑０逡逑０逦５逦１０逦１５逦２０逦２５逦３０逦３５逡逑时间（ｍｉｎ邋）逡逑一？一致死率（％）逦—？一正哭变率（％）逡逑图２．１紫外诱变时间对致死率和ｉＨ突变率的影响逡逑Ｆｉｇ２．邋ｌＥｆｆｅｃｔｓ邋ｏｆＵＶ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｔｉｍｅ邋ｏｎ邋Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋ｌ＾ｓｉｔｉｖｃ邋Ｍｕｔａｔｉｏｎ邋Ｒａｔｅ逡逑１９逡逑
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