转基因食品分子生物学检测方法的建立及应用

发布时间：2024-04-14 14:28

　　随着转基因技术的不断发展与转基因作物种植面积的不断扩大,越来越多的转基因食品进入到我们的生活中,转基因食品的安全性问题逐渐引起各国的重视及公众的关注。因此,对于转基因食品的检测技术及检测方法成为了专家学者关注的热点。本文以大豆及其制品为实验研究对象,选择了CTAB法、胍-三氯甲烷法和试剂盒法分别对大豆种子、豆芽和豆浆粉DNA进行提取,根据所提DNA的含量及纯度选择出最佳的核酸提取方法用于后续实验分析。结果显示:在以大豆及其加工制品作为材料时,CTAB法相较于另两种方法所提取的DNA含量及纯度更高,适合于转基因食品检测中核酸的提取。本文建立了转基因作物中常见的pCaMV35S、tNOS、t35S、pNOS、pFMV35S、Hpt、CP4-EPSPS、Cry1A.105、Cry2Ab2外源元件的定性PCR检测方法,相对检测下限可达0.1%⁰.5%。建立了转基因作物中常见的pCaMV35S、tNOS、t35S、pFMV35S、Vip3Aa20、Cry1A.105、Cry2Ab2外源元件的SYBR Green I荧光PCR检测方法,定性检测限(LOD)可达18^4...

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【部分图文】：

图1.22017年全球转基因作物种植的分布情况（来源：ISAAA）

图1.22017年全球转基因作物种植的分布情况（来源：ISAAA）显示了2017年全球种植转基因作物的国家及地区的分布情况转基因的种类和面积是最多的，占全球总种植面积的39.5%。来看，转基因大豆仍是全球种植面积最大的转基因作物，其次棉花、转基因油菜。17年，除了....

图1.3不同检测策略示意图

图1.3不同检测策略示意图目前商业化种植的转基因油菜、玉米、大豆中用到的启动子主要有：pCaMV35S，pFMV35S，pNOS，P-ract1，pSSuAra，pTA29；外源表达基因主要有：amy79，BAR，Barnase，Barstar，bxn，cordapA，Cr....

图1.4环介导等温扩增技术原理

图1.4环介导等温扩增技术原理测光定量PCR技术定量PCR技术是目前用于转基因检测的最成熟和最广。在转基因荧光定量PCR检测方法中使用最多的是SYan探针法[39-42]，由于其可以边扩增边检测，大大节省了要进行后续凝胶电泳实验，避免了交叉污染的可能。PCR....

图1.5数字PCR技术原理

图1.4环介导等温扩增技术原理检测荧光定量PCR技术定量PCR技术是目前用于转基因检测的最成熟和最广。在转基因荧光定量PCR检测方法中使用最多的是SYBqMan探针法[39-42]，由于其可以边扩增边检测，大大节省了要进行后续凝胶电泳实验，避免了交叉污染的可能....

本文编号：3954825