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胰腺癌患者骨形成蛋白-2基因启动子区甲基化筛查及功能研究

发布时间:2023-05-27 03:00
  目的:胰腺癌的发病率在全球范围内正在逐年上升,且恶性程度高、起病隐匿、进展迅速、预后极差。遗憾的是,至今尚未明确胰腺癌发生发展的具体机制。本课题前期在临床样本中发现:胰腺癌患者中存在骨形成蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)基因启动子区CpG岛高甲基化。据此,我们推测BMP-2基因启动子区CpG岛高甲基化可能导致抑癌基因表达下调从而引发胰腺癌。为了进一步证实我们的猜测,我们应用多种方法在临床样本中检测BMP-2甲基化率,同时构建BMP-2基因过表达PANC-1胰腺癌细胞模型体外反向验证BMP-2基因启动子区CpG岛高甲基化与胰腺癌之间的关系,并探索其可能的机制。方法:(1)焦磷酸测序(甲基化率定量):抽提3例胰腺癌(导管腺癌)患者的癌组织和癌旁组织,13例患者和3例健康对照者外周血DNA,经重亚硫酸氢盐转化、纯化及PCR扩增之后,焦磷酸测序分析,测定BMP-2基因启动子区CpG岛甲基化率(以健康对照的外周血及癌旁组织为参照);(2)甲基化特异性PCR(甲基化定性):抽提48例胰腺癌(导管腺癌)患者全血DNA经重亚硫酸氢盐转化、纯化及甲基化特异...

【文章页数】:55 页

【学位级别】:硕士

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中文摘要
英文摘要
前言
第一部分:胰腺癌患者BMP-2基因启动子区Cp G岛高甲基化的临床研究
    材料
    研究方法
    结果
    讨论
第二部分:构建BMP-2 过表达PANC-1 细胞体外反向验证临床结果
    材料
    研究方法
    结果
    讨论
第三部分:BMP-2基因启动子区高甲基化促进胰腺癌增殖和转移的机制探讨
    材料
    方法
    结果
    讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号:3823760

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